產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | A01X1514 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
種屬來(lái)源 | 人 |
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
18201748966 |
參考價(jià) | ¥8840 |
5×105 | 8840元 | 15 瓶 可售 |
更新時(shí)間:2024-04-01 11:39:03瀏覽次數(shù):237
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | A01X1514 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
種屬來(lái)源 | 人 |
人腦血管周細(xì)胞
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 人腦血管周細(xì)胞 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
商品貨號(hào) | A01X1514 |
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路:
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出,經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞,再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
實(shí)驗(yàn)步驟:
一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺(tái)中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。
七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。
注意事項(xiàng):
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠腹腔巨噬細(xì)胞 | 小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞 |
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣1重組兔單克隆抗體 | PE標(biāo)記的分選連接蛋白1抗體 |
小鼠心臟干細(xì)胞 | PE標(biāo)記的MCCC2蛋白抗體 |
小鼠前列腺干細(xì)胞 | PE標(biāo)記的D型天冬氨抗體 |
小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞 | PE標(biāo)記的半胱胺蛋白蛋白-6抗體 |
小鼠嗅上皮細(xì)胞 | PE標(biāo)記的LSM5蛋白抗體 |
小鼠腸道干細(xì)胞 | PE標(biāo)記的細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體 |
大鼠腸道干細(xì)胞 | PE標(biāo)記的植物肌動(dòng)蛋白抗體 |
人骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞 | PE標(biāo)記的鋅指蛋白ZNF919抗體 |
大鼠骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞) | PE標(biāo)記的TBC結(jié)構(gòu)域TBCD4蛋白抗體 |
人臍靜脈血來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞 | PE標(biāo)記的半乳糖凝集3單克隆抗體 |
小鼠NG2細(xì)胞 | 人腦血管周細(xì)胞PE標(biāo)記的細(xì)胞色b5抗體 |
人源NK細(xì)胞 | PE標(biāo)記的溶質(zhì)載體家族蛋白19成員A1抗體 |
人微血管周細(xì)胞 | PE標(biāo)記的DNA復(fù)制抑制因子抗體 |
大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞 | PE標(biāo)記的FLJ39378蛋白抗體 |