詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Avanafil | 1mL(10mM)|50mg|100mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
Avanafil(TA-1790)是高活性PDE-5抑制劑,IC50為5.2nM,對(duì)PDE1,PDE6和PDE11活性較低。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):330784-47-9 別名:TA1790 純度:98.28% 分子量:483.95 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
冰凍切片基質(zhì)金屬蛋白(MMP1/8/13)原位明膠譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒Human GPER(G-protein coupled estrogen receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor racemosus人結(jié)直腸腺癌;HT-29
冰凍切片堿性磷活性染色試劑盒Human VWA1 ELISA Kit拉丁屬名: Candida fukuyamaensis人腦多型膠質(zhì)母瘤;BT-325
冰凍切片膠原纖維(GIESON)染色試劑盒Human WDFY4 ELISA Kit拉丁屬名: Ustilago maydis人肺癌;A549 [A-549]
冰凍切片膠原纖維(MASSON)染色試劑盒Human VTI1B ELISA Kit用途: 與豌豆、蠶豆共生固氮人腎透明腺癌;786-0
冰凍切片膠原纖維(SIRIUS RED)染色試劑盒Human VWA2 ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium sp.人結(jié)腸癌;CaCo-2
冰凍切片膠原纖維戈德納(GOLDNER)染色試劑盒Human WDR1 ELISA Kit用途: 研究人肝癌;HepG2
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT)染色試劑盒Human WDR13 ELISA Kit拉丁屬名: Oceanobacillus profundus人肝癌;Huh-7
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT)染色試劑盒Human ZP3(Zona pellucida sperm-binding protein 3) ELISA Kit用途: 可耐受高濃度甲萘威,降解甲萘威,降解率達(dá)30%-50%。人神經(jīng)母瘤;SH-SY5Y
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)格莫瑞(Gomori)染色試劑盒Human WAPL/WAPAL ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae人膀胱移行癌;T-24
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)馬森(MASSON)染色試劑盒Human WSB2 ELISA Kit拉丁屬名: Gibberella zeae人B淋巴白血??;BALL-1
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)摩羅利 (mallory)染色試劑盒Human WFDC1 ELISA Kit拉丁屬名: coli小鼠源
冰凍切片抗性磷(TRAP)活性染色試劑盒Human MC4R(Melanocortin receptor 4) ELISA Kit拉丁屬名: ovis小鼠T淋巴瘤;Cyc-Tag(S49)
冰凍切片亮基肽活性染色試劑盒Human WDR40A ELISA Kit拉丁屬名: 凍干粉 厭氧亞硫鹽還原梭菌(定量) 小鼠骨髓;FDC-P1
冰凍切片磷化活性染色試劑盒Human WDR45 ELISA Kit拉丁屬名: Bradyrhizobium japonicum小鼠垂體瘤;GT1-1
冰凍切片磷脂尼羅紅(Nile Red)熒光染色試劑盒Human WDR4 ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用小鼠胚胎成骨前體;MC3T3-E1
冰凍切片磷脂皮爾斯(Pearse)染色試劑盒Human WDR5 ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium anthophilum小鼠胚胎成纖維(來(lái)自NIH3T3);PA12
人激M2型同工(M2-PK)免疫試劑盒死亡相關(guān)蛋白3抗體小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 石杉?jí)A甲
人(MGO)免疫試劑盒防御α6抗體小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒 (20R)-原人參二
人二單酰(malonyl CoA)免疫試劑盒S期激活化蛋白DBF4B抗體小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒 720005/0.1-2.5ul手動(dòng)單道可調(diào)式移液器(Dragonmed)
人二(MDA)免疫試劑盒脫氧胞苷激抗體小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 720000/0.5-10ul手動(dòng)單道可調(diào)式移液器(Dragonmed)
PDE-5抑制劑(Avanafil)胰蛋白胨水肉湯
英文名稱: Tryptone Broth
產(chǎn)品規(guī)格: BR
包裝:250克
用途:生化研究。
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