詳細(xì)介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PQR620 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
PRQ620是一個(gè)強(qiáng)的和選擇性的mTORC1/2的抑制劑,在體內(nèi)和體外都有很好的抗腫瘤特性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 純度:99.05% 分子量:445.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒 Human EFCAB14(EF-hand calcium-binding domain-containing protein 14) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae發(fā)酵纖維單胞菌
人食欲/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒Human KDM2A ELISA Kit拉丁屬名: coli豇豆慢生根瘤菌
人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒Human KCNJ5 ELISA Kit拉丁屬名: Monascus ruber鰒發(fā)光桿菌
人精加壓(AVP)ELISA試劑盒 Human KCNJ15 ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger斯氏梭菌
人垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)ELISA試劑盒Human KCNJ3 ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus velezensis嗜鹽四聯(lián)球菌
人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒Human KCNJ1 ELISA Kit拉丁屬名: Lysobacter xinjiangensis海蘇特氏菌
人神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒Human KCNK18 ELISA Kit用途: 食用、藥用海氏腸球菌
人利尿肽(KP)ELISA試劑盒 Human KCNN3 ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用Halobacillussp.
人神經(jīng)降壓(NT)ELISA試劑盒 Human KCNK5 ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用Hyphomonasrosenbergii
人γ肽(Pγ)ELISA試劑盒Human KCNN4 ELISA Kit用途: 試驗(yàn)栽培Ohtaekwangiakoreensis
人C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒Human KCNN1 ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces mediolani壞死梭桿菌壞死亞種
人阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒Human KCNV1 ELISA Kit拉丁屬名: Halorientalis regularis谷棒狀桿菌(黃色短桿菌)
人腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒Human KCNQ1DN ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis霍亂弧菌
人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒Human KCNH7 ELISA Kit拉丁屬名: 白酒 鉛 洋蔥伯克霍爾德氏菌
人制瘤M受體(OSMR)ELISA試劑盒Human KCTD12 ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae土生拉烏爾菌(土生克雷伯菌)
人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)ELISA試劑盒Human KCNS2 ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces roseolilacinus香茅假單胞菌
人Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒胞嘧啶脫抗體人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒 米仔蘭堿
人Ⅴ(FⅤ)免疫試劑盒C2GNT3蛋白抗體人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒 綿棗兒
人Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒磷化原癌基因c-Jun抗體人αN已?;咸擒?αNAG)ELISA試劑盒 木里嵐二
人凝血原前體蛋白(PIVKA-II)免疫試劑盒磷化原癌基因c-Jun抗體人αN已酰基葡糖苷(αNAG)ELISA試劑盒 苜蓿
mTORC1/2抑制劑(PQR620)4-基-1-甲基-3-正基-1H-吡唑-5-甲酰胺
其他 4-基-1-甲基-3-正基-1H-吡唑-5-羧酰胺
英文名稱: 4-Amino-1-methyl-3-n-propyl-5-pyrazolecarboxamide
其他英文名稱: 4-Amino-2-methyl-5-propyl-2H-pyrazole-3-carboxylic acid amide
產(chǎn)品規(guī)格: BR,96%
包 裝: 5克
CAS號(hào):139756-02-8
C8H14N4O=182.22
級(jí)別:BR
含量:≥96.0%
熔點(diǎn):98~101℃
性狀:粉末。
用途:生化研究。中間體
保存:RT