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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：剛果嗜皮菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013554
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit 人胞漿球蛋白Multi-class antibodies： 48T
Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
AFP-L2(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2) ELISA Kit 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2 96T
NUMBL 膜相關(guān)蛋白樣蛋白NUMBL抗體 0.2ml
Phospho-BTK (Tyr223) 磷化蛋白酪激ATK抗體 0.1ml
Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)Multi-class antibodies： 0.2ml
ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit 人內(nèi)皮1Multi-class antibodies： 48T
LRIG1 LRIG1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLF8/KLF3 KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體 0.1ml
dDAVP(Human Desmoin/1-desamino-8-D-arginine vasopressin) ELISA Kit 人去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓 96T
Prostaglandin E Receptor EP2 前列腺E2受體2抗體 0.2ml
CKAP4 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
LRIG1 LRIG1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
GIT2 G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASAM/ACAM 脂肪細(xì)胞特異性粘附分子抗體 0.1ml
IAA/FITC 熒光標(biāo)記吲哚-3-乙抗體/植物生長單克隆抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
P-AKT1/PKB1/2/3(pSer473) /FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激B(pSer473)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
剛果嗜皮菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 666生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
瘦果紅酵母種屬: Rhodotorula│acheniorum分離基物: fruit of Fragaria vesca (strawberry)提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
擬諾卡氏菌種屬: Nocardiopsis│sp.分離基物: 鹽湖土壤樣品提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)及嗜鹽微生物其它方面的研究培養(yǎng)基: 38生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法
短小芽孢桿菌種屬: Bacillus│pumilus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 性蛋白培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒甲異酯 97%2,4-二 98%間二甲氨基酚(>97%,BR)
α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA試劑盒 98%（劇品）2-巰基并噁唑 98%3-（氧硅基）甲基烯酯(>98%,BR)
α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒甲酯 98%直接紅80 AR3,4,5-氧基(>98%,BR)
α1微球蛋白(MGα1)ELISA試劑盒二 Standard for GC，>99.8%（T)間乙酮 98%3,4,5-氧基肉桂(>98%,BR)
α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒二 AR,99.5%辛二 99%藜蘆(>99%,BR)
α1抗胰糜蛋白(AACT)ELISA試劑盒二 CP,98%2,2,6,6-四甲基-1-氧基 98%3,5-二羥基甲(>98%,BR)
α1抗胰蛋白(α1-AT)ELISA試劑盒二 分析標(biāo)準(zhǔn)品5-氟尿嘧啶 99%3-溴噻吩(>95%,BR)
α1防御(DEFA1)ELISA試劑盒疊氮二酯 97% 二酰 98%3-溴(BR)
α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA試劑盒疊氮基基硅 93%氟硅銨 CP3-甲(>99%,BR)
α/β干擾受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒3- 98%六氟鈦，溶液 50%溶液3-氟甲(>98%,BR)
Z-DNA結(jié)合蛋白1(ZBP1)ELISA試劑盒異磺酰酯 98%2-溴間二甲 97%3-羥基甲(>98%,BR)
XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒三聚 99%溴乙芐酯 96%間羥基肉桂(>98%,BR)
Wnt-3a蛋白(WNT3A)ELISA試劑盒1,3-二氨基胍鹽鹽 97%溴乙 CP,98.0%3-甲(>98%,BR)
v-rel禽網(wǎng)狀內(nèi)皮過多癥病癌基因同源物B(RelB)ELISA試劑盒基氫鈉 95%溴乙 AR,98.5%(GC)3-甲(>98%,BR)
vav3鳥核苷交換因子(VAV3)ELISA試劑盒二鈉 96%溴乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-基磺鈉(>98%,BR)
UV切除修復(fù)蛋白RAD23同源物A(RAD23A)ELISA試劑盒基氫鈉 1.0 M in THF溴乙 Standard for GC,≥99.5% (GC)3-甲(>98%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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