化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1300 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 肝臟組織 | 種屬來源 | 人 |
詳細(xì)介紹
組織來源：肝臟組織
種屬來源：人
細(xì)胞簡介：肝星狀細(xì)胞位于Disse間隙內(nèi)，緊貼著肝竇內(nèi)皮細(xì)胞和肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。其形態(tài)不規(guī)則 ，胞體呈圓形或不規(guī)則形，常伸出數(shù)個(gè)星狀胞突包繞著肝血竇。
正常情況下肝星狀細(xì)胞表現(xiàn)為富含維生素A脂滴的靜止型， 其功能主要有：代謝和 貯存維生素A、儲(chǔ)存脂肪、合成和分泌膠原及糖蛋白、蛋白多糖等基質(zhì)成分、合成 基質(zhì)金屬蛋白酶及其組織抑制劑、表達(dá)細(xì)胞因子及受體、參與肝竇血流調(diào)節(jié)。
肝星狀細(xì)胞是細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源，正常情況下肝星狀細(xì)胞處于靜止?fàn)顟B(tài)。當(dāng) 肝臟受到炎癥或機(jī)械刺激等損傷時(shí)， 肝星狀細(xì)胞被激活， 其表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)?nbsp;激活型，肝星狀細(xì)胞激活并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞， 各種致纖維化因素均把 HSC作為最終靶細(xì)胞。激活的肝星狀細(xì)胞一方面通過增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與 肝纖維化的形成和肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建， 另一方面通過細(xì)胞收縮使肝竇內(nèi)壓升高。
培養(yǎng)基：原代星狀細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)：長梭狀，星狀細(xì)胞
傳代特性：細(xì)胞特性確定傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相： 空氣，95%；CO2 ，5%
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
人肝星狀細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1300 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
人肝星狀細(xì)胞是一種貼壁培養(yǎng)細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈長梭狀，星狀細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠支氣管上皮細(xì)胞 | 人皮膚肥大細(xì)胞 |
前列腺F2a受體抗體PGF2αR | 轉(zhuǎn)錄因子3重組兔單克隆抗體 |
大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞 | δ連環(huán)蛋白重組兔單克隆抗體 |
小鼠腦膜細(xì)胞 | DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11重組兔單克隆抗體 |
大鼠腦膜細(xì)胞 | 腎上腺能受體β2重組兔單克隆抗體 |
大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞 | C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體 |
人軟骨細(xì)胞 | C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體 |
小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 | 人增殖細(xì)胞核抗原單克隆抗體 |
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 | 程序性細(xì)胞死亡6-相互作用蛋白重組兔單克隆抗體 |
人表皮黑色細(xì)胞 | 基質(zhì)金屬蛋白-9重組兔單克隆抗體 |
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 氯霉抗體 |
大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 人肝星狀細(xì)胞基膜聚糖蛋白重組兔單克隆抗體 |
人破骨細(xì)胞 | 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子重組兔單克隆抗體 |
小鼠腦成纖維細(xì)胞 | CD169重組兔單克隆抗體 |
大鼠腦成纖維細(xì)胞 | 單克隆抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)