特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
LI-cadherin/FITC 熒光標(biāo)記肝腸鈣粘連蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
StAR/StARD1/FITC 熒光標(biāo)記促黃體誘導(dǎo)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AEG-1/LYRIC AEG-1抗體 0.2ml
Rabbit Goat IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
GTF2B 通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
StAR/StARD1/FITC 熒光標(biāo)記促黃體誘導(dǎo)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Gzms-A(Human granzymes A) ELISA Kit 人顆粒AMulti-class antibodies: 48T
NSE 神經(jīng)元特異性烯醇化抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFNAR2/IFNABR 干擾α受體2抗體 0.2ml
TF ELISA Kit 大鼠組織因子 96T
PTGFR 前列腺F2a受體抗體PGF2αR 0.2ml
C16orf7 16號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框7抗體 0.2ml
NSE 神經(jīng)元特異性烯醇化抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit rat IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
G protein beta subunit GI G蛋白/鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ApoA4 載脂蛋白A4抗體 0.1ml
IL-9/FITC 熒光標(biāo)記白介9抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
P-selectin/CD62p /FITC 熒光標(biāo)記P選擇抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒達(dá)松維爾擬諾卡氏菌達(dá)松維爾亞種種屬: Nocardiopsis│dassonvillei subsp. dassonvillei提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
羊布氏菌種屬: Brucella│melitensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 布氏P.I.抗原用于人 粗糙 突變株,強(qiáng)毒株培養(yǎng)基: CM0112生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
氧化氨假諾卡氏菌種屬: Pseudonocardia│ammonioxydans分離基物: 淤泥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0033生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
灰色北里孢菌種屬: Kitasatospora│griseola分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株;產(chǎn)生setamycine培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
腦鈉(BNP)ELISA試劑盒孔雀石綠 Biological stain2,3-二-1,4-萘醌 98%法羅培南(鈉)(2.5)
腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒甲基紫 AR1-代萘 98%法羅培南鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒甲基紫 IND(pH 0.1-2.0)1-硝基萘 CP,94%芐基肼
腦腸肽(Ghrelin)ELISA試劑盒萘酚綠B ≥80% (HPLC)1-硝基萘 99%芐基肼(標(biāo)準(zhǔn)品)
腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒1,10-菲羅啉,一 AR,98%β-萘酚 AR甲酰氟/PMSF
囊蟲(chóng)病抗體(CYT Ab)ELISA試劑盒鄰二酚紫 INDβ-萘酚 熒光指示劑, ≥99.0% (GC奧利司他
難辨梭狀芽孢桿菌B(TOXB)ELISA試劑盒鄰菲羅啉鹽鹽 98%3,5-二-1-溴 98%利福霉鈉;利福霉SV鈉
難辨梭狀芽孢桿菌A(TOXA)ELISA試劑盒酚紅 AR酮縮甘油 98%醋奧曲肽
鈉-化物依賴性牛磺轉(zhuǎn)運(yùn)體(SLC6A6/TAUT)ELISA試劑盒1,10-菲羅啉(無(wú)) 99%3,5-二異酯 97%S(+)-2-氨基-1-丁
母親DPP同源物4(Smad 4)ELISA試劑盒亞硝基鐵 CPN-甲基鄰二鹽鹽 99%D-鞘氨
末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移(TdT)ELISA試劑盒玫瑰紅鈉 AR1,2,3,5-四 96%糖脂;植物鞘
末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒羅丹明B AR1,2,3,5-四 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲磺丁脲
膜內(nèi)氨酰氨基肽(ANPEP)ELISA試劑盒羅丹明B 高純級(jí),≥95.0%(HPLC)1,3,5-三 99%甲磺丁脲(標(biāo)準(zhǔn)品)
膜聯(lián)蛋白A5(AnnexinA5)ELISA試劑盒半二甲酚橙 AR1,3,5-三標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.109mg/ml,基體: 異辛奧美拉唑
膜聯(lián)蛋白Ⅶ(ANX-Ⅶ)ELISA試劑盒二乙基二硫代氨鈉(銅試劑) AR,99.0%1,2,4,5-四 98%奧美拉唑 (標(biāo)準(zhǔn)品)
膜聯(lián)蛋白Ⅵ(ANX-Ⅵ)ELISA試劑盒氧化鍶 AR1,2,4,5-四標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.104mg/ml,基體:異辛唑沙宗