詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013469
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
LDH/FITC 熒光標記抗乳脫氫抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SSEA4/FITC 熒光標記階段特異性胚胎表面抗原-4IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aggrecanase-2/ADAMTS-5 軟骨蛋白聚糖抗體 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Glycophorin A 血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/Bio 生物標記的兔抗羊IgG 0.1ml
SSEA4/FITC 熒光標記階段特異性胚胎表面抗原-4IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
AAV(Human adeno-associated virus) ELISA Kit 人腺相關病毒Multi-class antibodies: 48T
phospho-IRS1(Ser789) 磷化胰島受體底物-1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Leptin 瘦抗體 0.1ml
E3(Human Estriol) ELISA Kit 人雌三醇 96T
PSMD7 蛋白調(diào)解因子7抗體 0.2ml
CLSTN2 老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS2抗體 0.2ml
phospho-IRS1(Ser789) 磷化胰島受體底物-1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗豬IgG 0.1ml
GRM4 促代謝型谷受體4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOJ/Clusterin 載脂蛋白J抗體 0.1ml
phospho-IKK beta (Tyr188) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
PROK1/EG-VEGF/FITC 熒光標記腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒50次鮑氏志賀氏菌種屬: Shigella│boydii提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: C 12培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereus分離基物: 牛奶提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
球形芽孢桿菌種屬: Bacillus│sphaericus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 殺蚊蟲高毒菌株培養(yǎng)基: 266生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
顆粒H(GZMH/CGL2/CTSGL2)ELISA試劑盒無碳鈉 AR4-(5-乙基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲 97%蘇丹/溶劑黑3
顆粒B(Gzms-B)ELISA試劑盒丁二鈉 AR,99.0%硫代乙乙酯 98%B
顆粒A(Gzms-A)ELISA試劑盒亞硝基鐵化鈉 99.98% metals basis3-氟-4-酚 99%7B/溶劑紅19/脂肪紅7B
人抗組織轉谷氨??贵wIgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒亞三酯 CP,97%對氟甲乙酯 99%蘇丹藍II/溶劑藍35
人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒亞三酯 98%3-氟芐 97%吖啶橙/性橙14
人抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒四氫糠 AR,98.0%8-氟-4-羥基-2-三氟甲基喹啉 97%甲基紅
人抗滋養(yǎng)膜抗體(ATA)ELISA試劑盒四氫糠 CP對氟甲甲酯 97%間甲基紅
人抗中性粒顆??贵w(ANGA)ELISA試劑盒四氫糠 99%6-羥基-2-吡啶羧 97%甲基紅鈉鹽/性紅2
人抗中性??贵w(ANA)ELISA試劑盒四甲基溴化銨 ARN-(2-)哌 98%西諾沙星;新惡
人抗中性粒核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒甲二異酯 98%(劇品)2-羥基 97%19-去甲-4-雄烯二酮
人抗中性粒胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒甲二異酯 Standard for GC(劇品)2-羥基 99%達格列凈一 ;達格列合物
人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒硫酚 99%(劇品)2-基酚 95%安塞曲匹/膽固脂轉移蛋白阻滯劑
人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA試劑盒四甲基溴化銨 離子對色譜級,≥99.0% (AT)(R)-(-)-5-羥甲基-2-酮 99%達比加群酯
人抗著絲點抗體(ACA)ELISA試劑盒四甲基溴化銨 ACS, ≥98.0%(S)-(+)-5-羥甲基-2-吡 98%利伐沙班
人抗增殖核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒乙 99%,含銅屑穩(wěn)定劑(S)-1-Boc-3-羥基吡咯 98%利伐沙班(標準品)
人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA試劑盒三 AR,99.5%2-羥基-4-三氟甲基嘧啶 97%阿哌沙班