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詳細介紹
中文名稱：阿爾瑪藍
英文名稱：Alamar Blue
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
阿爾瑪藍（Alamar Blue）是一種氧化還原指示劑，能根據(jù)代謝活性產(chǎn)生吸亮度變化和熒光信號。這是一種安全無毒的染料，可用于細胞活性和細胞增殖的定量分析以及細胞因子生物測定和體外細胞毒性研究，能有效測定動物、真菌和細菌細胞的天然代謝活性。Alamar Blue在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍色無熒光性，而在還原狀態(tài)下，轉變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物，反映所研究的細胞或微生物對氧分子的消耗，因而常被用作氧化還原指示劑，以顯示被觀察細胞和細菌的代謝活動。這種測定是基于具有代謝活性的細胞將試劑轉換成熒光和比色指示劑的能力。在細胞增殖過程中，細胞內NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，處于還原環(huán)境。攝入細胞內的染料被這些代謝中間體及細胞色素類還原后釋放到細胞外并溶于培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基從無熒光的靛青藍變成有熒光的粉紅色。受損和無活性細胞具有較低的天然代謝活性，因此對應的信號較低?？梢杂闷胀ǚ止夤舛扔嫽驘晒夤舛扔嫏z測，其激發(fā)光波長在530-560 nm之間，發(fā)射光波長為590 nm。吸光度和熒光強度與活性細胞數(shù)成正比。 |
本品可廣泛地用于細胞增殖代謝，藥物的細胞毒作用的體外測定以及病原微生物的的快速檢測與鑒定。 與臺盼蘭、TTC、MTT、MTS等分析法相比，Alamar Blue具有更多的優(yōu)勢。Alamar Blue采用單一試劑，可以連續(xù)、快速地檢測細胞的增生狀態(tài)。由于Alamar Blue對細胞無毒、無害，不影響細胞的抗體合成與分泌等活性，因此可以對同一批細胞的增生狀態(tài)進行連續(xù)觀察和進一步的實驗觀察，因此有操作簡便和幾乎不干擾細胞正常代謝的特點。
注意事項
1）需客戶自行準備100%還原型Alamar Blue試劑。為得到還原型Alamar Blue，需配制Alamar Blue與細胞培養(yǎng)基的混合溶液，Alamar Blue與細胞培養(yǎng)基的比值為1:10，高壓滅菌15min。（不能對濃縮的Alamar Blue高壓滅菌，也不能用PBS配制溶液，因為100%還原型Alamar Blue在PBS中不穩(wěn)定。）
2）為得到結果，建議實驗前先摸索孵育時間和接種細胞數(shù)量。
3）合適密度的細胞可以增加檢測靈敏度。對于96 孔板，我們建議每孔接種100 微升細胞，細胞濃度范圍為：貼壁細胞在100-10,000/孔，懸浮細胞在2,000-50,000/孔，并以培養(yǎng)基為空白對照。對于384 孔板，細胞濃度和接種量均減半。
4）整個過程均應為無菌操作，因為微生物污染物同樣可以還原檢測試劑而影響實驗結果。
5）注意接種細胞濃度和加入檢測試劑后孵育時間。細胞濃度過高或孵育時間過長，會導致繼發(fā)性還原反應，產(chǎn)生無色和熒光消失。
6）孵育時，須避光。
7）本產(chǎn)品可以使用熒光或分光光度計檢測，但熒光的靈敏度高，實驗誤差小，推薦使用熒光檢測。
儲存條件：4℃，有效期一年
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
腭/肺/鼻上皮癌關聯(lián)蛋白(PLUNC)elisa試劑盒英文名稱：PLUNC ELISA Kit19號染色體開放閱讀框80抗體包裝100g
多效生長因子(PTN)elisa試劑盒英文名稱：PTN ELISA Kit半胱雙加氧1抗體包裝25g
多配體蛋白聚糖1(SDC1)elisa試劑盒英文名稱：SDC1 ELISA Kit膠原蛋白11A2抗體包裝5g
多聚免疫球蛋白受體(PIGR)elisa試劑盒英文名稱：PIGR ELISA KitCUL4B蛋白抗體包裝1g
多聚蛋白2(MMRN2)elisa試劑盒英文名稱：MMRN2 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框103抗體包裝5g
多功能肽2(LMP2)elisa試劑盒英文名稱：LMP2 ELISA Kit凋亡抑制因子2抗體包裝25g
多功能蛋白聚糖(VS)elisa試劑盒英文名稱：VS ELISA Kit促腎上腺皮質激釋放激結合蛋白抗體包裝5g
多巴胺轉運蛋白(DAT)elisa試劑盒英文名稱：DAT ELISA Kit3號染色體開放閱讀框23抗體包裝1g
多巴胺受體D4(DRD4)elisa試劑盒英文名稱：DRD4 ELISA Kit瓜環(huán)肽抗體包裝25g
多巴胺受體D3(DRD3)elisa試劑盒英文名稱：DRD3 ELISA Kit分裂核仁蛋白1抗體包裝5g
多巴胺受體D1(DRD1)elisa試劑盒英文名稱：DRD1 ELISA Kit鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激4抗體包裝1g
多胺氧化(PAOX)elisa試劑盒英文名稱：PAOX ELISA Kit磷化鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激4抗體包裝25g
對氧磷2(PON2)elisa試劑盒英文名稱：PON2 ELISA Kit膠原蛋白4a2亞基抗體包裝5g
對氧磷1(PON1)elisa試劑盒英文名稱：PON1 ELISA KitCD161c抗體包裝100g
端粒關聯(lián)蛋白1(TEP1)elisa試劑盒英文名稱：TEP1 ELISA Kit補體C1r鏈多肽抗體包裝25g
根瘤菌(紫云英)Mesorhizobium│sp. 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品孕激/孕酮試劑盒野馬追內酯A;Eupalinolide
: ivcas7.01221資源名稱: 蕈狀芽胞桿菌 質量規(guī)格：>97%,進分sigma貨號A3656 鑰孔蟲戚血藍蛋白試劑盒乙氧基白屈菜紅堿; 5-Ethoxych
: 65092442資源名稱: 羊布氏菌 質量規(guī)格：>99%,BR鑰孔蟲戚血藍蛋白試劑盒異夏佛塔苷;Isoschaftoside
阿爾瑪藍乙二胺四乙二鈉鋅鹽
其他 乙二胺四乙鋅二鈉；EDTA二鈉鋅
英文名稱： Disodium zinc ethylenediaminetetraacetate tetrahydrate
產(chǎn)品規(guī)格： AR，98%
包裝：100克
CAS號：176736-49-5
C10H12N2O8ZnNa2•4H2O=471.64
級別：AR
含量：≥98.0%
干燥失重：14～16%
free zinc：≤0.01%
heavy metals：<0.001%
性狀：粉末
用途：生化研究。絡合劑。食品、油脂、飲料的色澤穩(wěn)定劑。調味劑
保存：RT
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
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