參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:剛地弓形蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013472
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 人S100蛋白Multi-class antibodies: 48T
SSEA3 階段特異性胚胎表面抗原-3Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM/APC APC標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml
Hsp-60 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白60 96T
NENF 神經(jīng)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體 0.2ml
BAFFR B細(xì)胞活化因子受體抗體 0.2ml
SSEA3 階段特異性胚胎表面抗原-3Multi-class antibodies: 0.2ml
TSH(Human Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 人促甲狀腺M(fèi)ulti-class antibodies: 48T
Phospho-LRP6 (Ser1490) 磷化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KLC1/KNS2 驅(qū)動(dòng)蛋白2抗體 0.2ml
HCV-IgG(Human Hepatitis C virus IgG) ELISA Kit 人丙型肝炎IgG 96T
PSMD12 26S蛋白調(diào)節(jié)亞型p55抗體 0.1ml
CACNG3 神經(jīng)元電壓門控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗體 0.2ml
Phospho-LRP6 (Ser1490) 磷化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit pig IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
Cobra poison Protein 眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白抗體 0.2ml
Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核因子κB激alpha/beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 0.5ml
pro-caspase3/FITC 熒光標(biāo)記半胱天冬-3原抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
剛地弓形蟲探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒50次鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
嗜熱脂肪地芽孢桿菌種屬: Geobacillus│stearothermophilus分離基物: 的罐頭食品提供形式: 凍干物模式菌株: yes培養(yǎng)基: 679生長(zhǎng)條件: 55℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi M1 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
人抗髓脂抗體IgA(anti-myelin Ab)ELISA試劑盒茜綠 Dye content 95%(R)-1-Boc-3-羥基吡咯 98% N-乙酰神經(jīng)氨/唾液
人抗髓脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒燦爛綠 高純級(jí),95%2-(1-基) 97%紅霉
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒鉍試劑Ⅰ 97%喹唑啉 98%紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒鉍試劑II CP三氟磺鈧 98%氫高烏甲(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗嗜中性粒胞漿抗體(ANCA)ELISA試劑盒鉍試劑II 98%四氫-2 2-二甲基-4H-吡喃-4-酮 95%氫高烏甲
人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA試劑盒考馬斯亮藍(lán)G250 AR三(4-溴基) 98%鹽多巴酚丁
人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒考馬斯亮藍(lán)G250 AR,無(wú)蛋白2-甲酰基噻唑 97%羥基β環(huán)糊精;2-羥基-β-環(huán)糊精
人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA試劑盒考馬斯亮藍(lán)G250 70%,用于電泳500ml透氣不透液墊片 40mm口徑 配套42mm口徑蓋羧甲基殼聚糖
人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)ELISA試劑盒考馬斯亮藍(lán)R250 AR1,3-二甲基 99%依諾肝鈉
人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒考馬斯亮藍(lán)R250 電泳級(jí),≥90 %(HPLC)3-基吡啶 97%依諾肝鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)ELISA試劑盒鈹試劑II AR2-基吡啶 98%曲美布汀馬來(lái)鹽; 3,4,5-氧基甲
人抗通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA試劑盒鉭試劑 AR,98.0%碳鋇 AR,99%馬來(lái)曲美布?。?biāo)準(zhǔn)品)
人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)ELISA試劑盒鹽副品紅 Dye content >85 %碳鍶 AR,99%肝鈉/肝脂鈉鹽
人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)ELISA試劑盒鹽副品紅 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-環(huán)戊酮 97%-β-環(huán)糊精
人抗人絨毛膜促性腺抗體(AhCGAb)ELISA試劑盒鹽副品紅(0.2%鹽副玫瑰 0.2% 1mol/L,0.2%鹽副玫瑰溶液碳鋇 AR,99%奈福泮/鹽平痛新
人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒鹽副品紅 Biological stain碳鋇 CP,98%甲氨蝶呤二鈉鹽
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。