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細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒III(FITC)

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更新時(shí)間:2022-04-20 11:41:26瀏覽次數(shù):598

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T
貨號(hào) FS-X9660 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒III(FITC)公司*的商品:突觸相關(guān)蛋白97抗體3,6-二水楊 DICHLOROSALICYLIC ACID, 3,6-(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
神經(jīng)囊泡循環(huán)蛋白2抗體3,6-二水楊 DICHLOROSALICYLIC ACID, 3,6-(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse
突觸相關(guān)蛋白29抗體DIBROM

詳細(xì)介紹

商品介紹:

工作原理:

在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活,細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結(jié)合在 DNA 斷點(diǎn)部位,可以通過生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后,再結(jié)合鏈酶親和素-熒光素 FITC(SABC-FITC)。FITC 在 490-495nm 激化,在 520-530nm 發(fā)射熒光,呈黃綠色。凋亡的細(xì)包核呈黃綠色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。


保存條件:-20℃冰凍保存一年。

試劑盒內(nèi)容:

1.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml

2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl

3.DIG-dUTP(×20)20μl

4.封閉液(Blocking Reagent)4ml

5.生物素化抗抗體(× 100)20μl

6.SABC-FITC(× 100)20μl

7.Proteinase K(×200)50μl

8.抗體稀釋液 4ml
產(chǎn)品屬于:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒III(FITC)


20T

1~3天

培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(FGFR1)elisa試劑盒英文名稱:FGFR1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白157抗體包裝5g

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子7(FGF7)elisa試劑盒英文名稱:FGF7 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90B抗體包裝10MG

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子3(FGF3)elisa試劑盒英文名稱:FGF3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體包裝25g

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF23)elisa試劑盒英文名稱:FGF23 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白104抗體包裝5g

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子18(FGF18)elisa試劑盒英文名稱:FGF18 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝1g

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子15(FGF15)elisa試劑盒英文名稱:FGF15 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體包裝25g

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子13(FGF13)elisa試劑盒英文名稱:FGF13 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體包裝5g

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子12(FGF12)elisa試劑盒英文名稱:FGF12 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白107抗體包裝1g

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子11(FGF11)elisa試劑盒英文名稱:FGF11 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體包裝5g

成纖維細(xì)胞激活蛋白α(FAPα)elisa試劑盒英文名稱:FAPα ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白56抗體包裝1g

沉默調(diào)節(jié)蛋白6(SIRT6)elisa試劑盒英文名稱:SIRT6 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白116抗體包裝5g

沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)elisa試劑盒英文名稱:SIRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白117抗體包裝1g

超氧化物歧化1(SOD1)elisa試劑盒英文名稱:SOD1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白127抗體包裝100g

腸型脂肪結(jié)合蛋白(FABP2)elisa試劑盒英文名稱:FABP2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白138抗體包裝25g

叉頭框蛋白P3(FOXP3)elisa試劑盒英文名稱:FOXP3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144NL抗體包裝5g

立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR游離狀腺試劑盒2-O-乙酰山椒子烯酮;

龐蒂亞克亞硫鹽桿菌Sulfitobacter│pontiacus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離睪酮試劑盒柚皮-7-O-葡萄糖苷;Narin

米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR游離蛋白S試劑盒異飛薊賓;Isosilybin
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒III(FITC)乙二胺四乙二鈉鈣鹽

其他 乙二胺四乙鈣二鈉;EDTA二鈉鈣;依地鈣二鈉二水合物;依地鈉鈣;EDTA 鈣鈉鹽

英文名稱: EDTA-2NaCa

其他英文名稱: Ethylenediaminetetraacetic acid disodium calcium salt hydrate;Calcium disodium ethylenediaminetetraacetate hydrate

產(chǎn)品規(guī)格: 特純,97%

包裝:250克

CAS號(hào):23411-34-9

C10H12N2O8CaNa2•xH2O=374.27 (anhydrous basis)

級(jí)別:purum

含量:≥97.0%

水溶解試驗(yàn):合格

水分:≤10.0%

性狀:結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。溶于水和,幾乎不溶于有機(jī)溶劑。30℃時(shí) 0.1mol/L水溶液pH約7。鉛和其他重金屬離子交換鈣形成水溶性重金屬絡(luò)合物。有刺激性。商品也有含2分子結(jié)晶水的

用途:生化研究。絡(luò)合劑。食品、油脂、飲料的色澤穩(wěn)定劑。調(diào)味劑

保存:RT

 


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