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細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(CY3)

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更新時(shí)間:2022-04-20 11:43:13瀏覽次數(shù):599

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T/100T
貨號(hào) FS-X9661 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(CY3)公司*的商品:突觸樣蛋白5亞型2抗體5,7-二氧芹菜定 DIMETHOXYAPIGENINIDIN, 5,7-(SH)Human, Mouse
絲合并蛋白3抗體(腫瘤差異表達(dá)蛋白)5-羥-4’,7-二氧黃 DIMETHOXYAPIGENIN, 4',7-(RG)(PLEASE CALL)Human, Mouse
Smad核轉(zhuǎn)錄共抑制因子抗體DIVINYL-PR

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬于:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(CY3)


20T/100T

1~3天

商品介紹:

工作原理:

在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi) 源性核酸內(nèi)切酶被激活,細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生 與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結(jié) 合在 DNA 斷點(diǎn)部位,可以通過生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后,再結(jié)合 鏈酶親和素-熒光素 CY3(SABC-CY3)。Cy3 在 554nm 激化,在 568-574nm 發(fā)射熒光,呈鮮紅色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。


保存條件:-20℃冰凍保存一年。

試劑盒內(nèi)容:

1.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml

2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl

3.DIG-dUTP(×20)20μl

4.封閉液(Blocking Reagent)4ml

5.生物素化抗抗體(× 100)20μl

6.SABC-CY3(× 100)20μl

7.Proteinase K(×200)50μl

8 抗體稀釋液 4ml
培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

叉頭框蛋白O3(FOXO3)elisa試劑盒英文名稱:FOXO3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄同源蛋白質(zhì)CUX2抗體包裝1g

叉頭框蛋白M1(FOXM1)elisa試劑盒英文名稱:FOXM1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白146抗體包裝5g

叉頭框蛋白A2(FOXA2)elisa試劑盒英文名稱:FOXA2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體包裝1g

層粘連蛋白β1(LAMβ1)elisa試劑盒英文名稱:LAMβ1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體包裝250mg

層粘連蛋白α1(LAMα1)elisa試劑盒英文名稱:LAMα1 ELISA Kit鈣粘附蛋白-11抗體包裝100g

補(bǔ)體因子D(CFD)elisa試劑盒英文名稱:CFD ELISA Kit核仁蛋白C23抗體包裝25g

補(bǔ)體因子B(CFB)elisa試劑盒英文名稱:CFB ELISA Kit皮膚相互作用蛋白2抗體包裝5g

補(bǔ)體成分5a受體1(C5aR1)elisa試劑盒英文名稱:C5aR1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框149抗體包裝25g

補(bǔ)體成分5a(C5a)elisa試劑盒英文名稱:C5a ELISA Kit碳化合物激結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)抗體包裝5g

補(bǔ)體成分5(C5)elisa試劑盒英文名稱:C5 ELISA Kit尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g

補(bǔ)體成分4b(C4b)elisa試劑盒英文名稱:C4b ELISA Kit補(bǔ)體C1qTNF8鏈多肽抗體包裝5g

補(bǔ)體成分4a(C4a)elisa試劑盒英文名稱:C4a ELISA Kit21號(hào)染色體開放閱讀框62抗體包裝1g

補(bǔ)體成分4(C4)elisa試劑盒英文名稱:C4 ELISA Kit磷化胞漿型磷脂A2抗體包裝5g

補(bǔ)體成分3(C3)elisa試劑盒英文名稱:C3 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框46抗體包裝1g

補(bǔ)體3a(C3a)elisa試劑盒英文名稱:C3a ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框103抗體包裝25g

鯊魚弧菌Vibrio│carchariae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離雌三試劑盒異鼠李-3-O-半乳糖苷;Isorha

假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR游離β絨毛膜促性腺激試劑盒茵芋堿;Skimmianine

沙門氏菌Salmonella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定幽門螺旋菌抗體試劑盒一枝蒿庚;Bullatine G;so
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(CY3)乙二胺四乙二鉀鹽

其他 乙二胺四乙鉀; EDTA二鉀鹽二水合物

英文名稱: EDTA-2K

其他英文名稱: Ethylenediaminetetraacetic acid dipotassium salt dihydrate;EDTA dipotassium salt dihydrate

產(chǎn)品規(guī)格: 超純,99%

包裝:100克/500克

CAS號(hào):25102-12-9

C10H14N2O8K2•2H2O=404.45

級(jí)別:Ultra pure grade

含量:≥99.0%

pH(50g/L,25℃):4.0~5.0

澄清度試驗(yàn):合格

硫鹽:≤0.01%

氯化物:≤0.002%

重金屬:≤0.001%

鐵:≤0.001%

性狀:結(jié)晶性粉末。易溶于水,不溶于乙。熔點(diǎn) 272℃(分解)。25℃時(shí)5%的水溶液pH 4~5

用途:生化研究。絡(luò)合劑。食品抗氧劑。醫(yī)藥助劑

保存:RT

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 


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