詳細介紹
中文名稱:MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒
英文名稱:MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格:500次
發(fā)貨周期:1~3天
MTS是一種新型甲臜化合物,和MTT同屬四唑氮衍生物。MTS能被活細胞里的線粒體脫氫酶降解而產(chǎn)生棕黃色水溶性的甲臜,通過測定甲臜的光譜吸收,進而可以測定細胞的增殖情況。 |
產(chǎn)品特點:
1.本試劑盒是單溶液式細胞增殖與細胞毒性檢測試劑,主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑,溶液的穩(wěn)定性強,反應(yīng)的靈敏度高。
2.操作簡便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
3.無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
4.與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
5.操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
儲存條件:低溫運輸,-20℃避光保存,有效期半年。
使用效果:
96孔板中加入細胞100μL/孔(約1×104),37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時,加入適當(dāng)濃度的受試化合物。培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間,每孔中加入10μL的MTS細胞增殖及毒性檢測溶液。37℃孵育1-4小時。490nm波長檢測光密度。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
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PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細胞株(高分化) Rattus
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ARSI芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體
ART1抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體
ARVCF精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體
ALDH1乙醛脫氫酶1型抗體
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser80)磷酸化乙酰羧化酶抗體
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263)磷酸化乙酰化酶抗體
phospho-ABCA1 (Ser2054)磷酸化腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體
phospho-Aconitase 1 (Ser138)磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
phospho-Aconitase 1 (Ser711)磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase beta (Ser220)磷酸化乙酰酶抗體
Annexin VI膜粘連蛋白6抗體
ANKRD42錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體
Anillin胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體
MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒Adenovirus 5 E1A binding protein腺病毒5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1)
APOA1載脂蛋白A1抗體
ATG16L自噬相關(guān)蛋白16A抗體
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)