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豬皮膚成纖維細胞永生化

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規(guī)格
1×1063000元15 瓶 可售
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更新時間:2024-04-08 15:47:21瀏覽次數(shù):249

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×106
貨號 A01X1241 主要用途 僅供科研實驗
組織來源 實驗動物的正常皮膚組織 種屬來源
豬皮膚成纖維細胞永生化公司正在出售的產(chǎn)品:人慢性骨髓單核細胞性白血病MV-4-11(STR鑒定正確)小鼠胰島瘤胰島β細胞Beta-TC-6(種屬鑒定)人胃癌細胞熒光標記 NCI-N87+luc (STR鑒定正確)人骨髓瘤細胞NCI-H929(STR鑒定正確)人胚腎上皮包裝細胞GP2-293(STR鑒定正確)人非小細胞肺癌細胞NCI-H1734(STR鑒定正確)人子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細胞永

詳細介紹

一、細胞基本屬性

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格

商品貨號

豬皮膚成纖維細胞永生化

1×106

A01X1241

細胞詳述

成纖維細胞屬于由中胚層分化而來的間質(zhì)細胞。由于這些細胞非常容易培養(yǎng),它們已經(jīng)被廣泛用于細胞和分子生物學(xué)研究中。一般而言,成纖維細胞能夠分泌I型和III型膠原等細胞外基質(zhì),并且研究表明不同器官中的成纖維細胞有顯著的不同。傷口修復(fù)時,真皮成纖維細胞由可增殖,可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的,可重塑基質(zhì)的表型,同時,它們會分泌大量的透明質(zhì)酸來應(yīng)對修復(fù)時的炎癥反應(yīng)。

該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。

注意事項:  收到細胞后第一次傳代建議1:2傳代,充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基,不能用來培養(yǎng)細胞。

細胞特性

1) 組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。

2) 細胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)   細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
5.jpg

二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化;

3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi);

4)待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

10.jpg

四、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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