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技術(shù)文章

轉(zhuǎn)基因植物Bt基因PCR檢測(cè)試劑盒操作流程

閱讀:228          發(fā)布時(shí)間:2020-2-19

                                         轉(zhuǎn)基因植物Bt基因PCR檢測(cè)試劑盒操作流程 

新春佳節(jié)來(lái)臨之際,祝福每一位勇敢的湖北人民,祝福每一位還在一線與病毒作頑強(qiáng)斗爭(zhēng)的醫(yī)護(hù)人員,祝福你們?cè)谛碌囊荒昀锷眢w安康、闔家幸福。接下來(lái)介紹  轉(zhuǎn)基因植物Bt基因PCR檢測(cè)試劑盒操作流程 

以下原則:
1、引物應(yīng)用核酸系列保守區(qū)內(nèi)設(shè)計(jì)并具有特異性。
2、 產(chǎn)物不能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。
3、引物長(zhǎng)度一般在15~30堿基之間。
4、G+C含量在40%~60%之間。
5、堿基要隨機(jī)分布。
6、引物自身不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
7、引物之間不能有連續(xù)4個(gè)堿基的互補(bǔ)。
8、引物5′端可以修飾。
9、引物3′端不可修飾。
10、引物3′端要避開(kāi)密碼子的第3位。

PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul

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