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技術(shù)文章

ELISA實驗血清與血漿樣本選取參照

閱讀:118          發(fā)布時間:2025-3-11

ELISA實驗時,檢測的指標(biāo)是用血清樣本好還是用血漿樣本?先給出結(jié)論,我們在判定指標(biāo)檢測時:凝血功能類指標(biāo)的檢測最好選擇血漿,免疫類指標(biāo)的檢測最好選擇血清。對于其他類型指標(biāo),包括細(xì)胞因子的變化等,通常情況下血清或血漿都可以選擇。

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一、血清與血漿的區(qū)別 

◇ 血清中無纖維蛋白原和某些凝血因子;

◇ 血清中無參與凝血的血漿蛋白;

◇ 血漿中無一些凝血過程中血小板釋放的物質(zhì)。

Tips:血漿可以通過去除纖維蛋白原等凝血因子形成血清。

◆ 血清多用于血液生化、免疫等方面的檢測;

◆ 血漿多用于凝血等方面的檢測;

◆ 全血則多用于血細(xì)胞、血常規(guī)、血沉等方面的檢測。

二、血清及血清的主要成分

血清是指血液凝固后,血漿成分中除去纖維蛋白原某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體,它是不含血細(xì)胞(包括血小板)等成分的血液液體部分。

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血漿與血漿的主要成分

血漿血液的重要組成部分,是全血經(jīng)抗凝處理后,通過離心分離出全部血細(xì)胞(包括血小板),所獲得的呈淡黃色透明液體的部分。血漿中含有纖維蛋白原(纖維蛋白原能轉(zhuǎn)換成纖維蛋白,具有凝血作用)和凝血因子。

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在藥代研究中二者各有優(yōu)缺點:

① 血漿中含有抗凝物質(zhì)(EDTA或肝素),可能干擾化合物的結(jié)合或檢測,血清則無;

② 血漿制備快速,直接低溫離心后即可分離,血清制備則耗時較長。這一點對藥代試驗影響較大,因給藥后4小時內(nèi)一般取血點較為密集;

③ 血清的凝血過程可能會與藥物產(chǎn)生吸附作用,從而減少血清的含量,造成實驗中的誤差。

三、血清、血漿的制備方法

# 血清樣本的制備 #

① 使用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液樣本,將試管或離心管在室溫下放置1小時或2-8℃過夜,分離出血清;

② 2-8℃條件下,以1000×g離心20分鐘,小心收集上層血清。

# 血漿樣本的制備 #

① 使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本,采集后30分鐘內(nèi),2-8℃條件下,以1000×g離心15分鐘,小心收集上層血漿;

常見的抗凝劑包括:EDTA鈉鹽,肝素鈉,枸櫞酸鈉等。ELISA實驗中,通常推薦EDTA鹽(EDTA-Na2EDTA-K2)作為抗凝劑。

以上是關(guān)于ELISA指標(biāo)檢測是用血清樣本還是血漿樣本的實驗干貨。


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