詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:胡桃PCR檢測試劑盒
英文名稱:
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關產(chǎn)品:
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馬鏈球菌(S. equi)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
受體3ELISA試劑盒 SSTR3Rat ai-cerol and cerosome aibody, ACA Elisa Kit
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生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子ELISA試劑盒 GROβ/CXCL2/MGSARat platelet factor 3, PF3 Elisa Kit
生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生激因子ELISA試劑盒 GROα/CXCL1/MGSARat Leptin Soluble Receptor, sLR Elisa Kit
生長激素誘導跨膜蛋白ELISA試劑盒 GHITMRat Caveolin-1, Cav-1 Elisa Kit
生長激素釋放因子ELISA試劑盒 GH-RFRat iduronate sulfatase, IDS Elisa Kit
生長激素釋放肽ELISA試劑盒 GhrelinRat Vascular Endothelial cell Growth Factor, VEGF Elisa Kit
生長激素結合蛋白ELISA試劑盒 GHBPRat Tumor necrosis factor α, F-α Elisa Kit
生長激素促分泌素受體ELISA試劑盒 GHSRRat Transforming Growth factor β1, TGF-β1 Elisa Kit
生長激素2ELISA試劑盒 GH2Rat Stem cell factor/mast cell growth factor, SCF/MGF Elisa Kit
生長分化因子-9ELISA試劑盒 GDF-9Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADPH Elisa Kit
酰胺酶ELISA試劑盒 BTDRat Platelet-Derived Growth Factor AB, PDGF-AB Elisa Kit
胡桃PCR檢測試劑盒半胱氨suan共軛β裂解酶2(CCbL2)重組蛋白Recombina Cysteine Conjugate Beta Lyase 2 (CCbL2)
Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白Recombina Toll Like Receptor 4 (TLR4)
甲硫氨酰tRNA合成酶2(MARS2)重組蛋白Recombina Methionyl tRNA Syhetase 2, Mitochondrial (MARS2)
甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白21C(METTL21C)重組蛋白Recombina Methylt?