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小鼠肝星狀細胞

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更新時間:2023-04-23 10:56:12瀏覽次數(shù):273

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肝臟組織
小鼠肝星狀細胞的相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437 (人肺癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶雞肺動脈內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶hFOB 1.19 (人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞) (STR鑒定正確) (只出售凍存)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人肺癌組織源細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肝星狀細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肝臟組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞(HSC)又名肝貯脂細胞、維生素A貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等,是肝臟細胞外基質(zhì)的主要來源。HSC在激活后可進一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞樣細胞,各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細胞。正常情況下,HSC處于靜止狀態(tài),當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機械刺激等損傷時,HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚?,激活的HSC可通過增生和分泌細胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建,此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi),是合成、分泌細胞外基質(zhì)的主要來源,在肝纖維化的發(fā)生中處于重要地位。肝星形細胞是肝臟*的間充質(zhì)細胞,約占肝臟細胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質(zhì)的主要細胞群,肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質(zhì)成分,合成一定量的膠原以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外,肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

肝黃單加氧1抗體 大腦和睪丸特異性免疫球蛋白超家族成員11封閉多肽 

精子細胞成熟蛋白1抗體 成纖維細胞生長因子受體1原癌基因伴侶蛋白封閉多肽 

英文名稱: Natrexone 蛋氨亞砜還原MSRA封閉多肽 

IQCJ抗體 腫瘤抑制基因LPP2封閉多肽 

Cyclin A1相互作用蛋白抗體 DNA連接4封閉多肽 

粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體 琥珀脫氫的組合因子1封閉多肽 

Wnt1誘導(dǎo)信號通路蛋白2抗體 鋅指蛋白635封閉多肽 

英文名稱: DDAH2 嗅覺受體52K2封閉多肽 

泛蛋白連接D3抗體 重組紅色熒光蛋白 

電壓門控鉀通道亞基Kv7.5抗體 線粒體核糖體蛋白L12封閉多肽 

肌微管相關(guān)蛋白7抗體 磷化核糖體S6蛋白激封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 磷化T細胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4封閉多肽 

成對樣同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2抗體 發(fā)育多能性相關(guān)蛋白3封閉多肽 

NDUAB蛋白抗體 有絲分裂氧化1封閉多肽 

自主生長因子1B抗體 類表皮生長因子域7封閉多肽 

鋅指蛋白99抗體 細胞色P450 1A1+1A2封閉多肽 

瘦抗體 神經(jīng)降壓受體1封閉多肽 

DENND5A蛋白抗體 核糖體蛋白L23A封閉多肽 
小鼠肝星狀細胞GES-1 (人胃黏膜細胞)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠肝竇內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

兔外周血巨噬細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

C3H/10T1/2, Clone 8 (小鼠胚胎成纖維細胞) (種屬鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

BT-549 (人乳腺管癌細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+0.01mg/ml Insulin+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

MV3 (人黑色瘤細胞)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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