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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>細(xì)胞分析>>細(xì)胞代謝>> 堿性磷酸酶(ALP)檢測試劑盒5

堿性磷酸酶(ALP)檢測試劑盒5
  • 堿性磷酸酶(ALP)檢測試劑盒5
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更新時(shí)間:2025-04-25 17:58:19瀏覽次數(shù):204評(píng)價(jià)

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產(chǎn)品概述 product description 堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,簡稱ALP或AKP)是廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤等組織經(jīng)肝臟向膽外排出的一種酶。這種酶能催化核酸分子脫掉5’磷酸基團(tuán),從而使DNA或RNA片段的5’-P末端轉(zhuǎn)換成5’-OH末端。 貝博TM BBcellProbe® (磷酸苯二鈉法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二鈉比色法,其檢測原理是磷酸苯二鈉在堿性條件下,可在堿性磷酸酶的作用下生成游離酚和磷酸,通過酶標(biāo)儀測定510nm處吸光度,據(jù)此通過比色分析就可以計(jì)算出堿性磷酸酶活性水平。 本試劑盒可用于檢測細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清等樣品中內(nèi)源性的堿性磷......
保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項(xiàng)
開蓋后組份按要求條件保存。
有效期
6個(gè)月
檢測方法
分光光度計(jì)
適用樣本
血清血漿/組織/細(xì)胞
產(chǎn)品應(yīng)用
分光光度計(jì)
儀器準(zhǔn)備
1.可見分光光度計(jì)
2.恒溫水浴鍋
3.離心機(jī)
4.漩渦混勻器
5.移液器
試劑準(zhǔn)備
1.純水
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
使用注意事項(xiàng)
1.待測樣品中不能含有磷酸酶抑制劑。
2.樣品避免反復(fù)凍融。
3.如果沒有分光光度計(jì),也可以使用酶標(biāo)儀測定。
4.所測樣本的值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限,應(yīng)稀釋樣品后重新測定。
5.空白管如果顯紅色,說明ALP顯色液不可用,應(yīng)丟棄。
6.加入顯色基液時(shí),應(yīng)迅速,并且及時(shí)混勻,否則顯色不充分。
使用方法
樣品測定:
1. 配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液
取出試劑D:標(biāo)準(zhǔn)品1mg/ml恢復(fù)至室溫后,取0.1ml溶解于1.9ml的試劑E:ddH2O中,使?jié)舛葹?.05mg/ml,即為標(biāo)準(zhǔn)品工作液。
參照下表稀釋系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液

2. 樣品準(zhǔn)備:
1) 細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液,如有必要需適當(dāng)勻漿;低速離心取上清,-80℃凍存,用于堿性磷酸脂酶的檢測;
2) 血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定;尿液通常也可以直接用于測定,-80℃凍存,但為了消除樣品本身顏色的干擾,需設(shè)置加了血漿或血清但不加底物的對(duì)照;
3) 高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的堿性磷酸酶,可以使用原有的裂解液或PBS等進(jìn)行稀釋,如雞血清、血漿可稀釋5~10倍后檢測。

3. 加樣:
依照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免氣泡的產(chǎn)生。如果樣品中的堿性磷酸酯酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再測定。樣品的檢測能設(shè)置平行管。
立即混勻,510nm,0號(hào)管(ddH2O)調(diào)零,測各管吸光度。

計(jì)算公式:
堿性磷酸酶金氏活性單位的定義:
在37℃條件下,100ml待測樣品與顯色底物(即ALP顯色液所含物質(zhì))作用15分鐘,產(chǎn)生1mg酚為一個(gè)金氏單位。

以系列標(biāo)準(zhǔn)品工作液(1~5號(hào)管)對(duì)應(yīng)的金氏單位為X軸,以相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)管吸光度(1~5號(hào)管)為Y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

以測定管與空白管的吸光度值的差額為實(shí)際的吸光度,用該差值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比,算出酶活力單位。

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