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CY5-N-羥基琥珀酰亞胺酯, CY5-NHS ester 的操作說明
閱讀：1425 發(fā)布時間：2018-7-29Cy5-NHS| Cy5@SE|146368-14-1 使用方法推薦
分子式：C37H43N3O10S2
分子量：753.88
溶解性：溶于水；DMSO
EX激發(fā)波長:646 nm
EM發(fā)射波長:664nm
用途：花菁染料Cy5，常被應(yīng)用于生物分子標(biāo)記，熒光成像及其他熒光生物分析。他們廣泛應(yīng)用于多肽，蛋白，核苷酸等。Cy5染料具有增強(qiáng)熒光結(jié)合后的蛋白質(zhì)。
儲存條件：避光 -20°C避光
供應(yīng)商：陜西新研博美生物科技有限公司
使用方法推薦:（僅供參考）
水溶性Cy5 NHS標(biāo)記 (D-ser2)-leucineenkephalin
1. Cy5 NHS 1.0 mg 溶解于400 μL DMSO后，加入到1mL 的玻璃瓶中盛有(D-ser2)-leucine-enkephalin acetate ( 0.75 mg) 的400 μL DMSO溶液。(Dye 和peptide 投料比是 1:1)
2. 然后加入15 μL三乙胺，常溫避光攪拌反應(yīng)混合物過夜。
3. 用HPLC 純化蛋白，使用蛋白C18柱子(25 cm×10 mm)，每次上樣注入2×400 μL，30分鐘梯度洗脫
從0.1% TFA水溶液到MeCN∶H2O(0.1% TFA)=70∶30，流速4mL /min。(對不同的蛋白選擇不同的合適HPLC梯度流動相)
4. 收集適當(dāng)?shù)纳珟Х?，?biāo)記多肽的保留時間比未標(biāo)記的多肽長。
5. 產(chǎn)品冷凍干燥成粉末或在水溶液中，-20℃避光儲存;必要時可用質(zhì)譜表征。
6.CyDye標(biāo)記的蛋白穩(wěn)定性取決于蛋白本身。例如標(biāo)記的IgG在4 ℃可避光保存2月;
更長期的保存需加入等體積的甘油-20 ℃避光保存。
F/P計算：
Cy5 在650 nm 的摩爾吸光系數(shù)為250 000 M-1 cm-1 ，所用蛋白在280 nm處的摩爾吸光系數(shù)為 170000 M-1 cm-1;
Cy5在280nm處的吸收是650nm處的5%。按以下公式計算F/P值。
[Cy5 dye] = (A650)/250 000
[peptide] =[A280 -(0.05×A650)]/170000
F/P final= [dye]/[peptide]= {0.68×A650}/ {A280 - (0.05×A650)}
陜西新研博美生物科技有限公司產(chǎn)品目錄價格表：
n-琥珀酰亞胺脂dye nhs esters
cyanine3 nhs ester
cyanine3.5 nhs ester
cyanine5 nhs ester
cyanine5.5 nhs ester
cyanine7 nhs ester
cyanine7.5 nhs ester
sulfo-cyanine3 nhs ester
sulfo-cyanine5 nhs ester
sulfo-cyanine5 bis-nhs ester
sulfo-cyanine7 nhs ester
炔烴 dye alkynes
cyanine3 alkyne
cyanine5 alkyne
cyanine5.5 alkyne
cyanine7 alkyne
cyanine7.5 alkyne
sulfo-cyanine3 alkyne
sulfo-cyanine5 alkyne
疊氮化物 dye azides
cyanine3 azide
cyanine3.5 azide
cyanine5 azide
cyanine5.5 azide
cyanine7 azide
cyanine7.5 azide
sulfo-cyanine3 azide
sulfo-cyanine5 azide
sulfo-cyanine7 azide
馬來酰亞胺 dye maleimides
cyanine3 maleimide
cyanine5 maleimide
cyanine5.5 maleimide
cyanine7 maleimide
cyanine7.5 maleimide
sulfo-cyanine3 maleimide
sulfo-cyanine5 maleimide
伯胺 primary amine
cyanine3 amine
cyanine5 amine
cyanine5.5 amine
cyanine7 amine
cyanine7.5 amine
sulfo-cyanine5 amine
sulfo-cyanine7 amine
馬來酰亞胺 dye maleimides
cyanine3 maleimide
cyanine5 maleimide
cyanine7 maleimide
sulfo-cyanine3 maleimide
sulfo-cyanine5 maleimide
羧酸 carboxylic acids
cyanine3 carboxylic acid
cyanine5 carboxylic acid
cyanine7 carboxylic acid
sulfo-cyanine3 carboxylic acid
sulfo-cyanine5 carboxylic acid
sulfo-cyanine7 carboxylic acid
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