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FITC-Phalloidin是一種熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）試劑
閱讀：74 發(fā)布時(shí)間：2025-3-26| 提 供 商 | 陜西新研博美生物科技有限公司 | 資料大小 | 1MB |
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理論分析：
英文名：FITC-Phalloidin
分子式：C56H60N10O15S2
分子量：1177.26
產(chǎn)品詳情：
規(guī)格：10mg、25mg、50mg 等
貨期：根據(jù)具體的產(chǎn)品而定
純度：95%+
用途：實(shí)驗(yàn)用途，科學(xué)研發(fā)，可定制服務(wù)
儲(chǔ)存條件：干燥、避光，短期（數(shù)天至數(shù)周）在 0 - 4 C 或長(zhǎng)期（數(shù)月至數(shù)年）-20 C。
注意事項(xiàng)：所有的試劑不可用于臨床，不可用于食用，人體。
產(chǎn)品應(yīng)用：
FITC-Phalloidin 是一種熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）試劑，常用于細(xì)胞生物學(xué)和組織學(xué)研究中，用于特異性標(biāo)記和檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的肌動(dòng)蛋白絲（F-actin）。
鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是一種從毒蘑菇中提取的環(huán)狀七肽毒素，具有親和力和特異性，能夠選擇性地結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲（F-actin），而不會(huì)與單體肌動(dòng)蛋白（G-actin）結(jié)合。FITC（Fluorescein Isothiocyanate）是一種綠色熒光染料，通過(guò)化學(xué)鍵與鬼筆環(huán)肽結(jié)合后，可以用于熒光顯微鏡觀察。
細(xì)胞和組織染色：FITC-Phalloidin 可用于固定和透化的細(xì)胞或組織切片的熒光染色，用于觀察細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)。
細(xì)胞形態(tài)學(xué)研究：通過(guò)標(biāo)記 F-actin，可以研究細(xì)胞的形態(tài)變化、細(xì)胞遷移和細(xì)胞分裂等過(guò)程。
定量分析：可以用于定量分析細(xì)胞內(nèi) F-actin 的含量。
包裝：
使用方法：
一、工作液準(zhǔn)備
1. 對(duì)于FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（300T）
本品以溶于甲醇的20µM儲(chǔ)存液形式提供，總量為300µl。按照100 nM的工作液濃度來(lái)?yè)Q算，可制備總量為60 ml的工作液。建議收到產(chǎn)品后，根據(jù)單次使用量，對(duì)母液進(jìn)行小量分裝，-20℃避光凍存，一年穩(wěn)定。
開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前，使用1×PBS緩沖液稀釋儲(chǔ)存液到需要的工作濃度。推薦工作濃度為：80~200nM。工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
2. 對(duì)于FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（1mg
本品以?xún)龈煞坌问教峁?，分子量?177.3，總量為1mg?？上扔眉状蓟蛘逥MSO充分溶解配制成20~100µM的儲(chǔ)存液。如，加入8.494ml甲醇到1mg鬼筆環(huán)肽即得到100µM等量的儲(chǔ)存液，根據(jù)單次使用量，進(jìn)行小量分裝，-20℃避光凍存，一年穩(wěn)定。
開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前，使用1×PBS緩沖液稀釋儲(chǔ)存液到需要的工作濃度。推薦工作濃度為：80~200nM。工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
二、染色步驟
1. 細(xì)胞爬片生長(zhǎng)24h，使其密度達(dá)到50%匯合度。
2. 吸掉培養(yǎng)液，37℃預(yù)熱的1×PBS（pH 7.4）清洗細(xì)胞2次。
3. 使用溶于PBS的4%甲醛溶液進(jìn)行細(xì)胞固定，室溫固定10min。
※ 注意：避免固定劑中含有甲醇成分，因?yàn)榧状荚诠潭ㄟ^(guò)程中可能破壞肌動(dòng)蛋白。
4. 室溫條件下，用PBS清洗細(xì)胞2~3次，每次10min。
5. 室溫條件下，用丙酮（≤-20℃）脫水或者用0.5% Triton X-100溶液透化處理5min。
6. 室溫條件下，用PBS清洗細(xì)胞2~3次，每次10min。
7. 取200µl配制好的 FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液，覆蓋住蓋玻片上的細(xì)胞，室溫避光孵育30min（通常情況下，4℃~37℃孵育皆可）。
注意：為了降低背景，可于FITC標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽工作液內(nèi)加入1% BSA；另外，孵育過(guò)程中為了避免溶液揮發(fā)，可將蓋玻片轉(zhuǎn)移到一個(gè)密封的容器內(nèi)。
8. 用PBS清洗蓋玻片3次，每次5min。
9. 使用200µl DAPI溶液（濃度：100 nM）對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染，約30s。
10. 用PBS清洗蓋玻片，然后倒置在已經(jīng)滴有一滴Fluoromount-GTM 水溶性封片劑的載玻片上。使用紙巾輕輕檫掉多余封片劑，然后用指甲油封片。此法制備的標(biāo)本玻片可置于4℃避光保存，通常6個(gè)月內(nèi)可繼續(xù)做F-actin染色分析。
※ 注意：也可以直接使用含有DAPI的抗熒光淬滅封片劑，合并步驟9）10），簡(jiǎn)化步驟。
11. 熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察，選擇FITC激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=496/516nm）和DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=364/454nm）。
相關(guān)試劑產(chǎn)品：
AF488 Phalloidin
Cyanine7 Phalloidin
FITC-GW3965
Vari Fluor 680-Phalloidin
Fluorescein-PEG-DBCO
Phalloidin-f-HM-SiR
Vinylsulfone-PEG-fluorescein
VS-PEG-FITC
FITC-Transferrin
Fluorescent Transferrin
FITC-Ureidopropionic acid
FITC-hyodeoxycholic acid
FITC-labeled Drisapersen sodium
FITC-Ricin Toxin
Retinoic acid-PEG-FITC
Niacin-PEG-FITC
Fluorescein-PEG-Niacin
SPA-FITC
Vari Fluor 633-Phalloidin
AlexaFluor 488 Phalloidin
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