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蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用分析;
蛋白質(zhì) - 多肽相互作用分析;
GST 標(biāo)記蛋白的檢測(cè)和定量;
蛋白質(zhì)表達(dá);
結(jié)合活性研究。
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
6760603R | AlphaScreen GST Detection Kit | GST 50K PTS |
這款試劑盒可應(yīng)用于:
蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用分析;
蛋白質(zhì) - 多肽相互作用分析;
GST 標(biāo)記蛋白的檢測(cè)和定量;
蛋白質(zhì)表達(dá);
結(jié)合活性研究。
在典型的 AlphaScreen®分析中,感興趣的生物分子被化并與鏈霉親和素包被的供體珠子結(jié)合。另一種生物分子帶有 GST 標(biāo)簽,并與 AlphaScreen® 抗 GST 受體珠子結(jié)合。如果這兩種生物分子相互結(jié)合,供體和受體珠子就會(huì)靠近。激發(fā)供體珠子會(huì)導(dǎo)致單線態(tài)氧的釋放,單線態(tài)氧擴(kuò)散并在受體珠子靠近時(shí)觸發(fā)其發(fā)光。光的量與相互作用的程度成正比。使用試劑盒中提供的化 GST 探針也可以進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)形式的分析。
AlphaScreen® 和 AlphaLISA™是基于珠子的分析技術(shù),用于以微孔板形式研究生物分子相互作用。首字母縮略詞 “Alpha" 代表放大的發(fā)光鄰近均相分析。顧名思義,這些技術(shù)的一些關(guān)鍵特征為它們是非放射性的均相分析。捕獲在珠子上的分子結(jié)合會(huì)導(dǎo)致能量從一個(gè)珠子轉(zhuǎn)移到另一個(gè)珠子,最終產(chǎn)生發(fā)光/熒光信號(hào)。要理解信號(hào)是如何產(chǎn)生的,必須首先了解珠子。AlphaScreen® 和 AlphaLISA™分析需要兩種珠子類型:供體珠子和受體珠子。每種珠子類型都含有不同的專有的化學(xué)混合物,這是 AlphaScreen® 技術(shù)的關(guān)鍵要素。供體珠子含有光敏劑酞菁,在680nm 光照下,它將環(huán)境中的氧氣轉(zhuǎn)化為激發(fā)態(tài)和活性形式的 O2,即單線態(tài)氧。請(qǐng)注意,單線態(tài)氧不是自由基;它是具有單個(gè)激發(fā)電子的分子氧。像其他激發(fā)分子一樣,單線態(tài)氧在回到基態(tài)之前具有有限的壽命。在其 4 微秒的半衰期內(nèi),單線態(tài)氧在溶液中可以擴(kuò)散約 200 納米。如果受體珠子在這個(gè)鄰近范圍內(nèi),能量就會(huì)從單線態(tài)氧轉(zhuǎn)移到受體珠子內(nèi)的噻嗯衍生物中,隨后在 520 - 620nm(AlphaScreen)或 615nm(AlphaLISA)處產(chǎn)生光。在沒(méi)有受體珠子的情況下,單線態(tài)氧回到基態(tài),不會(huì)產(chǎn)生信號(hào)。這種依賴于鄰近度的化學(xué)能量轉(zhuǎn)移是 AlphaScreen 均相性質(zhì)的基礎(chǔ)。