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- 61FG2XLB 產(chǎn)品型號(hào)
- revvity 品牌
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- 上海市 所在地
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):75更新時(shí)間:2024-10-31 10:22:55
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 61FG2XLB |
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產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 |
61FG2XLB | HTRF MAB ANTI FLAG M2-XL665 | 20K PTS |
單克隆抗體 Anti FLAG M2 - XL665 是一種針對(duì)用 XL665 標(biāo)記的 FLAG® 融合蛋白產(chǎn)生的 IgG1 抗體。與抗 FLAG®M1 抗體不同,M2 抗體將識(shí)別 FLAG® 融合蛋白 N 端或 C 端的 FLAG® 序列。
該試劑可用于生化和細(xì)胞兩種形式,以研究各種相互作用:蛋白質(zhì) / 蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì) / 肽、蛋白質(zhì) / DNA、蛋白質(zhì) / RNA、蛋白質(zhì) / 碳水化合物、蛋白質(zhì) / 小分子、受體 / 配體。
HTRF 可以檢測(cè)從皮摩爾到低毫摩爾的廣泛親和力常數(shù)范圍。
產(chǎn)品特點(diǎn)
檢測(cè)原理:在 HTRF 相互作用檢測(cè)中,一個(gè)部分(直接或間接)用供體標(biāo)記,另一部分用受體標(biāo)記(同樣直接或間接)。信號(hào)強(qiáng)度與兩部分的結(jié)合成正比。在此處所示的例子中:?jiǎn)慰寺】贵w Anti FLAG M2 - XL665 與帶 FLAG M2 標(biāo)簽的A部分結(jié)合,而B(niǎo) 部分* 與用 HTRF 供體標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合。 B部分*也可以是化的、帶標(biāo)簽的、Fc 融合的。在這些情況下,使用相應(yīng)的用供體標(biāo)記的 HTRF 試劑(抗標(biāo)簽、抗物種、蛋白 A、鏈霉親和素)進(jìn)行檢測(cè)。
檢測(cè)方案:右側(cè)的例子描述了使用 20µL 最終檢測(cè)體積來(lái)檢測(cè)帶 FLAG M2 標(biāo)簽的A部分和未帶標(biāo)簽的B部分* 之間相互作用的方案。分配兩個(gè)部分(10µL),孵育,加入單克隆抗體 Anti FLAG M2 - XL665(5µL)和用供體標(biāo)記的抗B部分(5µL),孵育并讀取。* B部分也可以是化的、帶標(biāo)簽的、Fc 融合的或直接標(biāo)記的。在這些情況下,使用相應(yīng)的用供體標(biāo)記的 HTRF 試劑(抗標(biāo)簽、抗物種、蛋白 A、鏈霉親和素)進(jìn)行檢測(cè)。
檢測(cè)細(xì)節(jié):
為特定應(yīng)用構(gòu)建 HTRF 相互作用檢測(cè):試劑按測(cè)試次數(shù)(20µL 反應(yīng))出售。與 XL665 或 d2 偶聯(lián)的抗體以每孔 20ng 抗體的量供應(yīng)。還提供每瓶中的活性部分量(以及每瓶中的示蹤劑數(shù)量 - 見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明表)?;钚圆糠侄x為結(jié)合物(例如抗體)的活性部分。
測(cè)試次數(shù)與活性部分的關(guān)系:每孔的平均結(jié)合物數(shù)量反映了總體生物材料含量。通常優(yōu)選使用活性部分的量而不是總結(jié)合物的量。對(duì)于穴狀化合物和 d2 結(jié)合物,總結(jié)合物的量等于活性部分的量,因?yàn)闃?biāo)記的分子量可以忽略不計(jì)。對(duì)于用 XL665 標(biāo)記的實(shí)體,總結(jié)合物的量將根據(jù) XL665 結(jié)合物的最終摩爾比而變化,然而,Revvity 提供的活性部分的量是恒定的,并且基于訂購(gòu)的測(cè)試次數(shù)。
標(biāo)記 / 物種抗體活性部分 / 5000 次測(cè)試物種和亞型特異性 FLAG® 單克隆抗體 M2 5 - 10µg 小鼠 IgG1 DYKDDDDK 肽。
推薦的穴狀化合物和 XL665 結(jié)合物的量:穴狀化合物結(jié)合物不能過(guò)量,以防止讀數(shù)器飽和和不可接受的背景水平。在大多數(shù)情況下,1 到 5nM 的穴狀化合物濃度是合適的,并且根據(jù)所使用的與 HTRF 兼容的讀數(shù)器,在 620nm 處將產(chǎn)生 20000 到 80000 cps。XL665 結(jié)合物必須盡可能與其檢測(cè)對(duì)應(yīng)物匹配,以便最大數(shù)量的生物分子被 XL665 受體標(biāo)記。因此,要檢測(cè)濃度為 20nM 的帶標(biāo)簽分子,抗標(biāo)簽 - XL665 的濃度應(yīng)是等摩爾或更高。