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技術(shù)文章

XM-15S美國MORSTE大面積紫外線燈進行菌種誘變育種實驗

閱讀:935          發(fā)布時間:2023-7-26
  XM-15S臺式紫外線燈,安裝有2根15w 254nm,鏡面鋁合金反光板,隔板可調(diào)臺式支架,是實驗室紫外照射的便捷工具。XM-15系列臺式紫外線燈支架有多個檔位可以調(diào)節(jié),方便老師做不同距離、不同強度的紫外線誘變照射實驗。
 
  短波波長254nm的紫外線,正好是食用菌遺傳變異物質(zhì)一核酸的吸收髙峰,菌種細胞即使受到紫外線的輕度照射,也會使遺傳物質(zhì)一一脫氧核糖核酸(DNA)發(fā)生巨大的變化。
 
  常見的變化有:DNA鍵的斷麵,氫鍵飭斷裂,嘧啶的水合化, 胸腺嘧啶二聚體的形成,八分乇內(nèi)和分子間的交聯(lián)等。 所以,紫外線是誘導食用菌,其它搟生物菌種發(fā)生變異的誘變劑,在誘變的基礎(chǔ)上,就可能選育出優(yōu)良的菌種來。
 
2.jpg
  用XM-15S大面積紫外線燈進行紫外線誘變育種,首先應準備孢子懸浮液。將新鮮食用菌無菌孢子移入5毫升無菌生理食鹽水(經(jīng)滅菌處理 的0.9%溶液),或磷酸緩沖溶液(由15克磷酸氫二鈉和2克磷酸二氫鉀共溶于1000亳升經(jīng)滅菌而得的蒸餾水)中,搖勻后即成孢子懸浮液,萁濃度以每毫升含孢子100萬至1億 個為宜。
 
  誘變時,在暗室內(nèi)開啟XM-15S大面積紫外線燈,調(diào)整紫外線燈臺式支架的隔板高度。開始先開燈20分鐘,波長穩(wěn)定后取5亳升孢子懸浮液 倒入直徑6厘米的無菌培養(yǎng)皿中,揭開皿蓋,搖動培養(yǎng)皿, 使照射均勻,照射時間0.5—1.0分鐘,照射后的抱子懸浮液每毫升含活孢子數(shù)在10—1000萬個之間。要得到單菌落,得 先用無菌水樣釋至每亳升10—100個,再取稀釋液0.2毫升, 涂布于裝有瓊脂的培養(yǎng)皿上,在25℃溫度下培育5—10天, 待菌落出現(xiàn)后,選純正、健壯的單菌落移入斜面試管培養(yǎng), 并做拮抗試驗。
 
  拮抗試驗是取處理和未處理的菌絲各一塊,接在同一斜面上,相距1 一2厘米,如處理后的孢子已發(fā)生變異,其菌絲與未處理的菌絲在相接處就會發(fā)生拮抗,形成一條明顯的拮抗線;若未發(fā)生變異,則兩方面的菌絲相連接成一體。
 

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