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重組人BMP4蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,在 -80℃ 條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因?yàn)槿芙獠缓脮?huì)降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意。
重組人BMP4的分泌表達(dá)優(yōu)點(diǎn):
1、一些可被細(xì)胞內(nèi)蛋白酶所降解的蛋白質(zhì)分泌到周質(zhì)或培養(yǎng)基中可增加其穩(wěn)定性;
2、有些在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)無活性的蛋白分泌表達(dá)時(shí)能夠按適當(dāng)?shù)姆绞竭M(jìn)行準(zhǔn)確折疊,增加到蛋白的活性;
3、 由于蛋白質(zhì)信號肽和編碼序列間被切割,所以分泌蛋白產(chǎn)物不含氨基酸起始密碼子 ATG 所編碼的甲硫氨酸,而甲硫氨酸會(huì)影響許多蛋白的活性。
重組人BMP4重組蛋白和天然蛋白有什么區(qū)別:
蛋白質(zhì)重組,先要全部水解為氨基酸,蛋白質(zhì)的種類多就是因?yàn)樗臄?shù)量大,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,空間結(jié)構(gòu)千變?nèi)f化。而基本的氨基酸只有20中,所以它重組以后就可能變成*不同的東西,控制和以前*無關(guān)的代謝過程。
基因重組只是控制同一性狀表達(dá)不同而已,但是它不會(huì)改變性狀的基本情況。如:控制眼睛顏色的基因,親本的基因重組之后可能親本為黑色,子代便為藍(lán)色。但不會(huì)控制眼睛顏色的基因在重組之后就變成控制耳朵的基因。