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大腸桿菌培養(yǎng)基,選擇增強(qiáng)型LB液體培養(yǎng)基

2024-10-17  閱讀(131)

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傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基是一種應(yīng)用廣泛和普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl,其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供無機(jī)鹽。


賽爾瑞成推出一款液體、無菌、即用型大腸桿菌培養(yǎng)基——賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基!

大腸桿菌培養(yǎng)基,選擇增強(qiáng)型LB液體培養(yǎng)基


賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基是在傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來,能夠較傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基大大提高菌體密度。同時(shí),可用作大腸桿菌的原核表達(dá)培養(yǎng)基(注:需添加誘導(dǎo)劑),可以提高目的蛋白表達(dá)量數(shù)倍。


使用賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基進(jìn)行大腸桿菌培養(yǎng)時(shí),操作流程與傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基使用方法一致。


應(yīng)用案例


1. 大腸桿菌DH5α培養(yǎng)對(duì)比結(jié)果
      以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基,37°C,180rpm培養(yǎng):

大腸桿菌培養(yǎng)基,選擇增強(qiáng)型LB液體培養(yǎng)基


2. 大腸桿菌BL21(DE3)培養(yǎng)對(duì)比結(jié)果
      以含有質(zhì)粒pET21a-O的BL21(DE3)為測(cè)試菌種(該菌種表達(dá)蛋白O)。以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基(含相應(yīng)抗生素),37°C,180rpm培養(yǎng):

大腸桿菌培養(yǎng)基,選擇增強(qiáng)型LB液體培養(yǎng)基


3. 大腸桿菌BL21(DE3)/pET21a-O誘導(dǎo)表達(dá)培養(yǎng)對(duì)比結(jié)果
      以含有質(zhì)粒pET21a-O的BL21(DE3)為測(cè)試菌種(該菌種表達(dá)蛋白O)。以1: 1000比例轉(zhuǎn)種過夜活化菌至新鮮培養(yǎng)基(含相應(yīng)抗生素),37°C,180rpm培養(yǎng),至OD600=1時(shí),加入IPTG(終濃度1mM)誘導(dǎo)表達(dá)外源蛋白,繼續(xù)37°C培養(yǎng):

大腸桿菌培養(yǎng)基,選擇增強(qiáng)型LB液體培養(yǎng)基大腸桿菌培養(yǎng)基,選擇增強(qiáng)型LB液體培養(yǎng)基


結(jié)論:在本次培養(yǎng)基和誘導(dǎo)表達(dá)條件下,O蛋白在賽多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)基中的表達(dá)總量明顯高于傳統(tǒng)LB培養(yǎng)基。


多培®增強(qiáng)型LB預(yù)混培養(yǎng)單瓶500mL僅需85元!


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不用添加IPTG誘導(dǎo)劑,不用監(jiān)測(cè)OD值,培養(yǎng)過夜,輕松收菌,獲得的菌量和蛋白表達(dá)量提高數(shù)倍。搖瓶和發(fā)酵罐均可用。

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