檢測原理

孔雀石綠快速檢測試紙卡應(yīng)用了競爭抑制免疫層析的原理，樣本中的孔雀石綠在流動的過程中與膠 體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合，抑制了抗體和 NC 膜檢測線（T 線）上的孔雀石綠—BSA 偶聯(lián)物 的結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測線顏色的變化。

樣品收集和前處理

實驗過程中，用紅色標(biāo)記筆進行標(biāo)記，黑色標(biāo)記筆含有結(jié)晶紫，會對該實驗造成污染魚、蝦樣本前處理方法：

（1）用均質(zhì)器均質(zhì)組織樣本；

（2）稱取 1.00.05g  均質(zhì)物至 10ml 新聚苯乙烯離心管中，加入 1ml 去離子水，渦動 2min，加入 100  l孔雀石綠提取劑 1，再加入 1 瓶孔雀石綠提取劑 2，渦動 2min，3000g以上，室溫（20-25℃）離心5min； 

（3）取上清液 1ml 上清液至 10ml 新聚苯乙烯離心管中，加入 50μ l 孔雀石綠氧化劑,渦動 15s，于 50～60℃水浴氮氣或空氣流下吹干；

（4）加入 0.3ml 樣品復(fù)溶液渦動溶解 3min，取 100  l 用于分析。

操作步驟

（1）從原包裝中取出試劑桶，打開后取出所需數(shù)目的微孔試劑和試紙卡，并做好標(biāo)記。請在 60min 內(nèi)盡快使用。所需微孔試劑取出后，請立即蓋好試劑桶蓋，防止受潮。

（2）用微量移液器吸取 100 l 待檢樣本溶液于微孔中，緩慢抽吸且充分與微孔中試劑混勻。

（3）室溫（20~25℃）孵育 3min 后，吸取混勻液約 100ul垂直滴于加樣孔（S 孔）中。

（4）液體流動時開始計時，反應(yīng) 5min，根據(jù)示意圖判定結(jié)果，其他時間判定無效。