外泌體粒徑檢測服務(wù)是包含核酸和蛋白質(zhì)的小囊泡(30-200 nm),是由各種各樣的細胞分泌產(chǎn)生,在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。本產(chǎn)品是自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,經(jīng)過優(yōu)化處理適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液和其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳液以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效獲得高純度的外泌體顆粒。
測量外泌體的粒徑分布一直以來都是外泌體表征的重要組成部分。但是由于外泌體的尺寸僅為30~200 nm,所以必須借助一些特殊的檢測手段才能夠?qū)@種在光學(xué)顯微鏡下不可視的顆粒進行觀測。本篇就外泌體粒徑測量技術(shù)的發(fā)展進行簡述,并對不同技術(shù)的差異進行比較。在外泌體發(fā)現(xiàn)的早期,由于還沒有專門針對這類尺寸顆粒的分析方法,因此直接在電鏡下面觀察粒徑并統(tǒng)計成為了最早的外泌體粒徑統(tǒng)計方法。但是這種方法費時費力,且通量低,在面對臨床和科研中的大量樣本時顯得十分無力。
由于外泌體與材料學(xué)所合成的脂質(zhì)體在形態(tài)上十分相似,因此用于脂質(zhì)體表征的動態(tài)光散射技術(shù)(DLS)便被應(yīng)用于外泌體的尺寸測量上。DLS利用光射到遠小于其波長的小顆粒上時會產(chǎn)生瑞利散射現(xiàn)象,通過觀察散射光的強度隨時間的變化推算出溶液中顆粒的大小。但是這種技術(shù)會受到測量物質(zhì)的顏色、電性、磁性等理化特性的影響,并且對于灰塵和雜質(zhì)十分敏感。因此使得DLS在測量尺寸較小的粒子時,測量出的粒徑與實際的分布具有較大的偏差。
為了彌補DLS的短板,納米粒子跟蹤分析(外泌體粒徑檢測服務(wù))技術(shù)孕育而生。這種技術(shù)采用激光散射顯微成像技術(shù),用于記錄納米粒子在溶液中的布朗運動軌跡,并通過Stokes-Einstein方程推算粒子大小。這種技術(shù)能夠?qū)?0~1000 nm的粒徑進行測量,因此能夠提供更為精確的粒徑數(shù)據(jù)。在諸多文獻的測試中均取得了較DLS更好的精度,因此成為目前最為主流的外泌體尺寸測量手段。
外泌體粒徑檢測服務(wù)技術(shù)的工作原理與DLS技術(shù)在測量不同尺寸納米球的數(shù)據(jù)對比??梢娤啾扔贒LS,外泌體粒徑檢測服務(wù)測量的粒徑分布更為精確。
雖然外泌體粒徑檢測服務(wù)取得了比DLS 更高的精準(zhǔn)性,但是隨著外泌體研究的深入,其局限性也十分明顯。首先外泌體粒徑檢測服務(wù)僅能夠測量溶液中顆粒的平均粒徑尺寸,但是外泌體粒徑檢測服務(wù)無法分辨其中的外泌體、囊泡、脂蛋白,也不能區(qū)別不同源性的外泌體。這直接限制了外泌體粒徑表征的意義,使得研究者很難探究外泌體尺寸與外泌體來源之間的關(guān)系。另外外泌體粒徑檢測服務(wù)本身對于測試時的溫度、濃度和校準(zhǔn)都有著較高要求,因此使得外泌體粒徑檢測服務(wù)在測試較小的粒子時其精度仍不能達到令人滿意的效果,其測試結(jié)果卻仍與電鏡、AFM等成像技術(shù)所觀測到的粒徑存在著明顯差異。外泌體在TEM下的成像及粒徑統(tǒng)計與外泌體粒徑檢測服務(wù)測量的結(jié)果對比??梢?strong>外泌體粒徑檢測服務(wù)測量到的粒徑要比TEM直接測量的結(jié)果大50~100。
表征測試是外泌體研究的重要一環(huán),特別是針對分離提取后的外泌體進行濃度檢測和粒徑分布檢測,對于后續(xù)的功能和進一步分析是*的步驟。表觀生物提供基于Nanosight儀器定量檢測外泌體粒徑和濃度,方便、快捷、精準(zhǔn),助您深入探索外泌體的神秘世界!
儀器利用激光光源照射納米顆粒懸浮液,利用全黑背景則功能強信號,可以清晰觀察到帶有散射光的顆粒的布朗運動。對于寬分布體系,NTA軟件可以同時對于每一個顆粒進行直接觀測,進行自動跟蹤,進行粒徑計算,并且同時得到整個體系的粒徑分布信息。結(jié)合顆粒的散射強度,可以繪制出粒徑,對應(yīng)數(shù)量分布強度和散射強度的三維圖譜,可以對于粒徑相同但是材質(zhì)不同的樣品作出清晰區(qū)分。可以保存顆粒運動的錄像和圖片信息,用于將來做進一步分析。
2、送樣時,樣品須一直處于低溫環(huán)境中(推薦干冰寄送;短時間內(nèi)可以采用藍冰條件下運輸);
3、送樣前須告知溶劑的具體情況;可使用的溶劑,默認為水,其他非腐蝕性溶劑也行;但折射率需與水接近(1.3-1.5),如油不可作為溶劑
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