犬瘟熱抗原快速檢測(cè)卡說(shuō)明書

原理：犬瘟熱經(jīng)常流行于多種肉食動(dòng)物中，尤其是犬更容易通過(guò)呼吸系統(tǒng)感染。由于這種病難于治愈，所以死亡率。病犬在感染犬瘟熱病毒（CDV）約1周以后可以在血液中檢查出病毒，感染約2周以后出現(xiàn)發(fā)熱、干咳、結(jié)膜炎、嘔吐、腹瀉等癥狀。通常，免疫能力較差的3 - 4月幼犬的發(fā)病率較高，特別是發(fā)病以后中樞神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生病變而死亡的情況較多。犬瘟熱病毒抗原快速檢測(cè)卡采用了快速免疫層析檢測(cè)技術(shù)，用于檢測(cè)犬瘟熱病毒抗原。?

把眼屎、唾液、血清或血漿加入到加樣孔后，與膠體金標(biāo)記的抗CDV單克隆抗體一起沿層析膜移動(dòng)。若樣品中存在CDV抗原時(shí)，與檢測(cè)線上的抗體結(jié)合而顯示酒紅色。如果樣品中不存在CDV抗原時(shí)，則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。

【操作方法】

在檢測(cè)卡的加樣孔內(nèi)加入2滴（100ul）待檢血清或血液樣品。

將檢測(cè)卡平放于桌面上，在室溫下靜置20分鐘內(nèi)判定結(jié)果。超過(guò)20分鐘的結(jié)果只能作為參考。

【使用步驟】 在進(jìn)行測(cè)試前先完整閱讀使用說(shuō)明書，使用前將試劑板和待檢樣本溶液恢復(fù)至室溫（20℃~30℃）。
1.從原包裝袋中取出試劑板，水平放置于觀察者正面， 如上圖右側(cè)所示（打開后請(qǐng)立即使用）；
2.吸取待檢樣品溶液 100 微升于金標(biāo)微孔中，用小滴管 吹打*溶解孔內(nèi)紅色物質(zhì)，等待反應(yīng) 5 分鐘；
3.吸取孔內(nèi)所有溶液滴加到加樣孔（見(jiàn)上圖）中，加樣 后開始計(jì)時(shí)；
4. 結(jié)果應(yīng)在 5～8 分鐘讀取，其他時(shí)間判讀無(wú)效。
 

【結(jié)果判斷】
反應(yīng)板中央出現(xiàn)十字紅線為陽(yáng)性，只出現(xiàn)一字橫線為陰性；橫線與豎線均不出現(xiàn)，或僅豎線出現(xiàn)為試劑失效或操作有誤，應(yīng)當(dāng)重新測(cè)試。

組織檢測(cè)步驟：
  1、將樣本魚蝦蟹、畜禽肉、內(nèi)臟等去皮去脂肪,用均質(zhì)器均質(zhì)樣本，稱取3±0.05g均質(zhì)物至15ml離心管中。
  2、依次加入4ml蒸餾水、0.5ml試劑A和0.6ml衍生化試劑，振蕩混勻，在65℃水浴中孵育30min。
  3、依次加入1ml試劑B、0.4ml試劑C和1瓶提取劑（4ml），振蕩混勻。
  4、在室溫下（20-25℃）4000r/min離心5min，取2ml上層有機(jī)相至5ml離心管中，在50-60℃水浴中用氮?dú)猓ɑ蚬咎峁┑目諝獯蹈蓛x）吹干。
  5、取1ml凈化劑溶解干燥物，再加入0.5ml試劑D振蕩混勻，在室溫下（20-25℃）4000r/min離心2min，待檢。

?如使用全血標(biāo)本檢測(cè)，標(biāo)本的移動(dòng)速度可能較慢，必要時(shí)可在加樣約1分鐘后，在加樣孔內(nèi)滴加1滴PBS作輔助液，以促進(jìn)標(biāo)本移動(dòng)。