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[供應(yīng)]狂犬病毒抗體檢測試劑盒
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  • 狂犬病毒抗體檢測試劑盒
貨物所在地:
北京北京市
產(chǎn)地:
北京
更新時(shí)間:
2024-08-06 21:00:06
有效期:
2024年8月6日 -- 2025年2月6日
已獲點(diǎn)擊:
288
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產(chǎn)品簡介

狂犬病毒抗體檢測試劑盒采用阻斷ELISA法,在酶標(biāo)板條微孔上預(yù)包被狂犬病毒抗原。在試驗(yàn)中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過溫育后,若樣品中含有狂犬病毒特異性抗體,則與包被板上的抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)的抗狂犬病毒單抗,樣本中的抗體阻斷了單抗與包被板上抗原的結(jié)合;經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化產(chǎn)生的藍(lán)色信號(hào)與樣本中的抗體含量成反比,加入終止液

詳細(xì)介紹

狂犬病毒抗體檢測試劑盒

狂犬病毒(Rabies virus, RBV)抗體檢測試劑盒用于檢測貓、犬等動(dòng)物血清中的狂犬病毒抗體,用于評估狂犬病毒疫苗免疫狀況。

狂犬病毒抗體檢測試劑盒采用阻斷ELISA法,在酶標(biāo)板條微孔上預(yù)包被狂犬病毒抗原。在試驗(yàn)中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過溫育后,若樣品中含有狂犬病毒特異性抗體,則與包被板上的抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)的抗狂犬病毒單抗,樣本中的抗體阻斷了單抗與包被板上抗原的結(jié)合;經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化產(chǎn)生的藍(lán)色信號(hào)與樣本中的抗體含量成反比,加入終止液終止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀450nm波長測定反應(yīng)孔中的吸光度A值。

 

組份

1

抗原預(yù)包被板條

1/2塊

6

終止液

11ml

2

酶結(jié)合物

11/22ml

7

陰性對    照

1/2ml

3

10倍濃縮洗滌液

100ml

8

陽性對    照

0.5ml/1ml

4

顯色液

11/22ml

9

封板膜

2/4張

5

樣本稀釋液

100ml

10

說明書

1份

 

需自備的設(shè)備及試劑

1. 微量移液器:10μl-100μl、100μl-1000μl。

2. 一次性移液器吸頭。

3. 量筒:500ml。

4. 96孔板酶標(biāo)儀。

5. 蒸餾水或去離子水。

6. 洗瓶或洗板機(jī)。

 

樣品制備

取動(dòng)物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血。

 

洗滌液的準(zhǔn)備

濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫,如有鹽結(jié)晶,搖動(dòng)使結(jié)晶的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

 

注意事項(xiàng)

1. 試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,應(yīng)將試劑盒各組份放置室溫至少1小時(shí)以上。使用前應(yīng)搖勻,使用后放回2-8℃。

2. 不同品種、不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。

3. 終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時(shí)應(yīng)該注意防護(hù)。

4. TMB(顯色液)不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。

5. 檢測板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8℃)。

6. 所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。

7. 嚴(yán)格遵守操作說明可以獲得*的結(jié)果。操作過程中移液、定時(shí)和洗滌等的全部過程必須準(zhǔn)確。

8. 抗原包被板為一次性用品,不得重復(fù)使用;

 

操作步驟

1. 每次試驗(yàn)均設(shè)置陽性對照1孔、陰性對照2孔,陰、陽性對照不用稀釋,直接取100ul加入反應(yīng)孔。

2. 將樣品稀釋液按90ul/孔加入到微孔反應(yīng)板內(nèi),之后將待檢樣品血清按10ul/孔加入孔內(nèi)并吹打混勻(移液器槍頭請勿混用);

3. 蓋上封板膜(可按實(shí)際需要自行裁剪),置37℃溫育60分鐘。

4. 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作濃度洗滌液每孔加250ul,后甩去孔內(nèi)液體,以上步驟重復(fù)4-6次,*在干凈吸水紙上拍干。

5. 每孔加酶結(jié)合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。

6. 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌4-6次, 方法同4。切記*在干凈吸水紙上拍干。

7. 每孔加顯色液100μl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色15分鐘。

8. 每孔加終止液50μl,使反應(yīng)終止,10分鐘內(nèi)測定結(jié)果。

 

結(jié)果判定

用酶標(biāo)儀于450nm(630nm作參比波長)讀取吸光度OD值。

試驗(yàn)成立的條件是

陰性對照(N)OD值>0.5,同時(shí)陽性對照(P)阻斷率>50%;

計(jì)算方法:

PI (阻斷率)=  1 —(樣品OD值 ÷ 陰性O(shè)D均值)

陰陽性判斷:

PI(阻斷率)>40%則判斷為陽性;

PI≤40%則判斷為陰性。

注:(PI=40%相當(dāng)于抗體滴度0.5IU/ml)

 

有效期

貯存方法 2 - 8oC下貯存。

有效期 12個(gè)月。

 

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