江蘇ROHS2.0鄰苯二甲酸酯類檢測流程
鄰苯二甲酸酯類檢測流程
樣品前處理:
㈠ 索氏方法
取5 ~ 10g樣品,破碎至3mm×3mm,混勻,精密稱取2.0000g,置于用濾紙疊成的萃取筒中,加入**量為:提取器虹吸一次,再倒入提取器的三分之二,于45℃的水浴中,索氏萃取8小時,將萃取液轉(zhuǎn)移到蒸發(fā)皿中,水浴揮干,殘渣用甲醇定容于25.00ml容量瓶中,搖勻,用0.45μm的有機(jī)濾膜過濾,存于玻璃樣品瓶中,待測。
注:將溶劑改為甲醇,必要時可以用二氯甲烷溶解蒸發(fā)皿中的提取物,然后用甲醇定容。主要目的是將蒸發(fā)皿中的提取物溶解并轉(zhuǎn)移至容量瓶中。
㈡ 超聲萃取方法(針對液體樣品)
取5 ~ 10g樣品,混勻,精密稱取2.0000g,置于50ml的具塞平底燒瓶中,加入25.00ml甲醇(移液管或移液槍移取),塞上蓋子后用生料帶(聚四氟乙烯膜)封口,室溫超聲兩小時,補重,用0.45μm的有機(jī)濾膜過濾,存于玻璃樣品瓶中,待測。
(三)微波萃取法
取5 ~ 10g樣品,破碎至3mm×3mm,混勻,精密稱取0.5000g,置于微波萃取罐中,加入15ml乙酸乙酯,100度條件下微波處理30min,功率為500w,轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿后揮干,殘渣用甲醇定容于25.00ml容量瓶中,搖勻,用0.45μm的有機(jī)濾膜過濾,存于玻璃樣品瓶中,待測。
注:對于比較臟的樣品需要進(jìn)行凈化處理,特別是對于皮革材質(zhì)的樣品,經(jīng)過微波處理后需要經(jīng)過凈化處理。
凈化柱:凈化柱為hahnschliff(規(guī)格:220*15mm),由4g硅膠和1cm硫酸鈉組成。硅膠在使用前加入10%的水使其失去活性(將硅膠放在燒杯中,加適量水,然后在室溫和大氣壓下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)1小時,此硅膠可以再室溫下儲存密封玻璃瓶內(nèi))。
凈化步驟:先用15ml正己烷潤洗凈化柱,棄去以上過柱液,將提取液通過凈化柱,控制流速為0.5滴/S,再用20ml**沖洗萃取瓶,沖洗液也轉(zhuǎn)移到凈化柱中。洗脫液中再加入50ml**(分兩次加入)。濃縮收集液至干,用甲醇定容至25ml,過濾,待測。
色譜條件:
流 動 相:乙腈:水 色 譜 柱:AQ-C18
檢測波長(UV): 224nm 柱 溫:30℃
流 速:1.0 ml/min 進(jìn) 樣 量:10μl
梯度模式(針對鄰苯7p) | ||
時間(min) | 水(A) | 乙腈(B) |
0 | 25 | 75 |
5 | 15 | 85 |
15 | 0 | 100 |
22 | 0 | 100 |
23 | 25 | 75 |
梯度模式(針對鄰苯16p) | ||
時間(min) | 水(A) | 乙腈(B) |
0 | 30 | 70 |
5 | 10 | 90 |
10 | 0 | 100 |
18 | 0 | 100 |
19 | 50 | 50 |
28 | 50 | 50 |
30 | 30 | 70 |
測試:
流動相準(zhǔn)備:
取色譜純乙腈和超純水,在溶劑過濾器中用0.45μm的有機(jī)濾膜過濾,再超聲10~20min脫氣,并放至溶劑托盤內(nèi)(LC-CO310柱溫箱)。
標(biāo)準(zhǔn)品配制
準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)100mg左右,用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中,定容至刻度線,配制成1000ppm的儲備液。移取一定量的儲備液,置于25ml容量瓶,配制成所需濃度的標(biāo)液。
上機(jī)測試:
(1)開機(jī)
a. 接通穩(wěn)壓器的電源,依次打開LC-P310泵、LC-UV310紫外檢測器、LC-CO310柱溫箱,待檢測器自檢結(jié)束波長顯示254nm時,打開電腦主機(jī)、顯示器、打印機(jī)。
b. 打開LC-P310恒流泵后,逆時針轉(zhuǎn)動排空閥(約30°),用隨機(jī)配備的30ml注射器抽出液體10~15ml(或者設(shè)置泵界面上按鈕,使其條件至沖洗purge狀態(tài),任其沖洗直至泵自動停止),再將排空閥恢復(fù)至原位;
c. 打開LC-WS310液相色譜工作站窗口。
(2)平衡系統(tǒng)
在工作站相應(yīng)的項目下分別設(shè)定好所需要的值:
波長:224nm
柱溫:30℃
流速按下面不同模式處理
平衡模式:每次以0.1ml/min的增量加大流速至1.0ml/min,以流動相沖洗系統(tǒng)至基線平穩(wěn)(約15min~30min),并注意觀察管路連接、柱接口及泵頭處是否漏液,如漏液應(yīng)予以排除。
(3)進(jìn)樣
a. 先用色譜純甲醇清洗注射器,再用試樣溶液清洗注射器,并排除氣泡后抽取10μl。
b. 將進(jìn)樣閥手柄轉(zhuǎn)動至Load位置,將注射器針*插入進(jìn)樣閥入口中,平穩(wěn)地注入試樣溶液,除另有規(guī)定外,讓注射器留在進(jìn)樣閥上,將進(jìn)樣閥手柄快速轉(zhuǎn)動至Inject位置,系統(tǒng)將自動運行,采集數(shù)據(jù)并記錄圖譜。
c. 讓進(jìn)樣閥手柄保持在Inject位置,約1~2min后切換回Load位置,將注射器從進(jìn)樣閥中拔出。
d. 先用甲醇再用試樣溶液清洗注射器后,按以上程序繼續(xù)進(jìn)樣,直至完成。
(4)數(shù)據(jù)處理和打印
(5)清洗系統(tǒng)和關(guān)機(jī)
a. 數(shù)據(jù)采集完畢后,關(guān)閉氘燈,繼續(xù)以工作流動相沖洗30min。
b. 清洗進(jìn)樣閥:
Ⅰ. 用啟動注射器吸10ml甲醇;
Ⅱ. 將注射針導(dǎo)入口沖洗頭(Rheodyne部件號7125-054)連接到注射器出口上(不要針),并將它們一起接到進(jìn)樣口上;
Ⅲ. 使進(jìn)樣閥保持在Inject位置,慢慢將甲醇推入,甲醇將通過注射針導(dǎo)入口、引導(dǎo)管、注射針導(dǎo)入管和注射針密封圈,由樣品溢出管排出。
c. 完成后,先將流速緩慢降到0,關(guān)閉工作站,再依次關(guān)閉泵、檢測器、柱溫箱,斷開電源。
(6)填寫使用記錄。
鄰苯二甲酸鹽6項標(biāo)準(zhǔn)色譜圖