流式細(xì)胞儀配套空壓機(jī)

WERTHER國際成立于1970年，公司總部設(shè)在意大利雷焦凱德。主要提供空氣壓縮機(jī)，WETHER 空壓機(jī)由意大利著名的空壓機(jī)及汽保設(shè)備制造集團(tuán)WERTHER INTERNATIONAL S.p.A.榮譽(yù)出品， 憑借25年的專業(yè)空壓機(jī)制造經(jīng)驗(yàn)，特別是在靜音空壓機(jī)（噪音低于45分貝）領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢。

經(jīng)過四十年的發(fā)展，werther已成為全球空壓機(jī)和真空泵制造商之一，公司總部設(shè)在意大利瑞吉?dú)W艾米利亞，擁有15,000平方的現(xiàn)代化生產(chǎn)基地，產(chǎn)品銷售到90多個(gè)國家和地區(qū)，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、科學(xué)實(shí)驗(yàn)、分析儀器、印刷、食品加工、氣動(dòng)等領(lǐng)域。

技術(shù)參數(shù)：

型      號(hào)：P 50 TC AL

電機(jī)功率：0.46Kw

產(chǎn)  氣 量：50L/Min （0bar）

產(chǎn)  氣 量：37L/Min （5bar）

氣罐體積：3.5L

噪 音  量：40dB/A

壓      力：8Bar/120Psi

流式細(xì)胞儀（Flow cytometer ）是對細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量，并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把細(xì)胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細(xì)胞計(jì)是一種零分辨率的儀器，它只能測量一個(gè)細(xì)胞的諸如總核酸量，總蛋白量等指標(biāo)，而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說，它的細(xì)節(jié) 分辨率為零。

流式細(xì)胞儀主要由四部分組成。它們是：流動(dòng)室和液流系統(tǒng)；激光源和光學(xué)系統(tǒng)；光電管和檢測系統(tǒng)；計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)。上圖為其結(jié)構(gòu)示意圖。

流動(dòng)室和液流系統(tǒng)

流動(dòng)室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成，常用光學(xué)玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。設(shè)計(jì)和制作均很精細(xì)，是液流系統(tǒng)的心臟。樣品管貯放樣品，單個(gè)細(xì)胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出；鞘液由鞘液管從四周流向噴孔，包圍在樣品外周后從噴嘴射出。為了保證液流是穩(wěn)液，一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用，被檢測細(xì)胞被限制在液流的軸線上。流動(dòng)室上裝有壓電晶體，受到振蕩信號(hào)可發(fā)生振動(dòng)。

激光源和光學(xué)系統(tǒng)

經(jīng)特異熒光染色的細(xì)胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光；激光器又以氬離子激光器為普遍，也有配和氪離子激光器或染料激光器。光源的選擇主要根據(jù)被激發(fā)物質(zhì)的激發(fā)光譜而定。汞燈是弧光燈，其發(fā)射光譜大部分集中于300～400nm，很適合需要用紫外光激發(fā)的場合。氬離子激光器的發(fā)射光譜中，綠光514nm和藍(lán)光488nm的譜線*，約占總光強(qiáng)的80%；氪離子激光器光譜多集中在可見光部分，以647nm較強(qiáng)。免疫學(xué)上使用的一些熒光染料激發(fā)光波長在550nm以上，可使用染料激光器。將有機(jī)染料做為激光器泵浦的一種成份，可使原激光器的光譜發(fā)生改變以適應(yīng)需要即構(gòu)成染料激光器。例如用氬離子激光器的綠光泵浦含有Rhodamine6溶液的染料激光器,則可得到550～650nm連續(xù)可調(diào)的激光，尤在590nm處轉(zhuǎn)換高，約可占到一半。為使細(xì)胞得到均勻照射，并提高分辨率，照射到細(xì)胞上的激光光斑直徑應(yīng)和細(xì)胞直徑相近。因此需將激光光束經(jīng)透鏡會(huì)聚。光斑直徑d可由下式確定：d=4λf/πD。λ為激光波長；f為透鏡焦距；D為激光束直徑。色散棱鏡用來選擇激光的波長，調(diào)整反射鏡的角度使調(diào)諧到所需要的波長λ。為了進(jìn)一步使檢測的發(fā)射熒光更強(qiáng)，并提高熒光訊號(hào)的信噪比，在光路中還使用了多種濾片。帶阻或帶通濾片是有選擇性地使某一濾長區(qū)段的光線濾除或通過。例如使用525nm帶通濾片只允許FITC（Fluoresceinisothiocyanate,異硫氰熒光素）發(fā)射的525nm綠光通過。長波通過二向色性反射鏡只允許某一波長以上的光線通過而將此波長以下的另一特定波長的光線反射。在免疫分析中常要同時(shí)探測兩種以上的波長的熒光信號(hào)，就采用二向色性反射鏡，或二向色性分光器，來有效地將各種熒光分開。

光電管和檢測系統(tǒng)

經(jīng)熒光染色的細(xì)胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號(hào)而進(jìn)行測量的。光電倍增管（PMT）較為常用。PMT的響應(yīng)時(shí)間短，僅為ns數(shù)量級；光譜響應(yīng)特性好，在200～900nm的光譜區(qū)，光量子產(chǎn)額都比較高。光電倍增管的增益從10到10可連續(xù)調(diào)節(jié)　，因此對弱光測量十分有利。光電管運(yùn)行時(shí)特別要注意穩(wěn)定性問題，工作電壓要十分穩(wěn)定，工作電流及功率不能太大。一般功耗低于0.5W；最大陽極電流在幾個(gè)毫安。此外要注意對光電管進(jìn)行暗適應(yīng)處理，并注意良好的磁屏蔽。在使用中還要注意安裝位置不同的PMT，因?yàn)楣庾V響應(yīng)特性不同，不宜互換。也有用硅光電二極管的，它在強(qiáng)光下穩(wěn)定性比PMT好。

從PMT輸出的電信號(hào)仍然較弱，需要經(jīng)過放大后才能輸入分析儀器。流式細(xì)胞計(jì)中一般備有兩類放大器。一類是輸出信號(hào)輻度與輸入信號(hào)成線性關(guān)系，稱為線性放大器。線性放大器適用于在較小范圍內(nèi)變化的信號(hào)以及代表生物學(xué)線性過程的信號(hào)，例DNA測量等。另一類是對數(shù)放大器，輸出信號(hào)和輸入信號(hào)之間成常用對數(shù)關(guān)系。在免疫學(xué)測量中常使用對數(shù)放大器。因?yàn)樵诿庖叻治鰰r(shí)常要同時(shí)顯示陰性、陽性和強(qiáng)陽性三個(gè)亞群，它們的熒光強(qiáng)度相差1～2個(gè)數(shù)量級；而且在多色免疫熒光測量中，用對數(shù)放大器采集數(shù)據(jù)易于解釋。此外還有調(diào)節(jié)　便利、細(xì)胞群體分布形狀不易受外界工作條件影響等優(yōu)點(diǎn)。

計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)

經(jīng)放大后的電信號(hào)被送往計(jì)算機(jī)分析器。多道的道數(shù)是和電信號(hào)的脈沖高度相對應(yīng)的，也是和光信號(hào)的強(qiáng)弱相關(guān)的。對應(yīng)道數(shù)年縱坐標(biāo)通常代表發(fā)出該信號(hào)的細(xì)胞相對數(shù)目。多道分析器出來的信號(hào)再經(jīng)模-數(shù)轉(zhuǎn)換器輸往微機(jī)處理器編成數(shù)據(jù)文件，或存貯于計(jì)算機(jī)的硬盤和軟盤上，或存于儀器內(nèi)以備調(diào)用。計(jì)算機(jī)的存貯容量較大，可存貯同一細(xì)胞的6～8個(gè)參數(shù)。存貯于計(jì)算機(jī)內(nèi)的數(shù)據(jù)可以在實(shí)測后脫機(jī)重現(xiàn)，進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析，最后給出結(jié)果。除上述四個(gè)主要部分外，還備有電源及壓縮氣體等附加裝置。