不銹鋼開口直壁容器10L(蛔蟲卵測定)由上海書培實驗設(shè)備有限公司提供,專門用于蛔蟲卵測定沉淀集卵法的*耗材,其它相關(guān)耗材包括(提供冰箱、篩網(wǎng)、不銹鋼開口直壁容器、開口直壁量筒、螺口尖底離心管、離心機、一次性巴氏滴管、漩渦混勻器、顯微鏡、定量計數(shù)框1ml網(wǎng)格和定量計數(shù)框5ml S型)。
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品名稱:不銹鋼開口直壁容器10L(蛔蟲卵測定)
規(guī)格:10L
材質(zhì):304不銹鋼加厚
用途:蛔蟲卵測定沉淀集卵法,水質(zhì)檢測常用耗材
相關(guān)耗材:
冰箱、離心機、顯微鏡、漩渦混勻器
篩網(wǎng)、不銹鋼開口直壁容器、開口直壁量筒、
螺口尖底離心管、一次性巴氏滴管
定量計數(shù)框1ml網(wǎng)格和定量計數(shù)框5ml S型)
廢物處理:實驗的虹吸液煮沸10分鐘后可按普通廢物處理,含乙酸乙酯的廢液按危險廢物處理。
注意事項:實驗操作人員要注意自身防護(hù),避免蛔蟲卵的污染。
蛔蟲卵測定 沉淀集卵法:
蛔蟲卵分受精卵和未受精卵。受精卵呈寬橢圓形?;紫x卵一旦進(jìn)入人體,在它發(fā)育到成熟的整個過程中都會給人體造成危害?;紫x卵在土壤、肥料、人體等自然界廣泛存在!防止糞便污染環(huán)境是切斷蛔蟲傳播途徑的重要措施。
蛔蟲卵死亡率直接影響肥料的效果,可采用五格三池貯糞法,使糞便中蟲卵大部分沉降在池底。由于糞水中游離氨的作用和厭氧發(fā)酵,蟲卵可被殺滅,同時也會增加肥效。在用于糞做肥料的地區(qū),可采用泥封堆肥法,三天后,糞堆內(nèi)溫度可上升至52℃或更高,可以殺死蛔蟲卵。
那么蛔蟲卵死亡率又是如何測定的呢?依據(jù)GB/T 19524.2—2004如下:將堿性溶液與肥料樣品充分混合,分離蛔蟲卵,然后用密度較蛔蟲卵密度大的溶液為漂浮液,使蛔蟲卵漂浮在溶液的表面,從而收集檢驗。
1、蛔蟲卵分離
稱取5.0~10.0 g樣品(顆粒較大的樣品應(yīng)先進(jìn)行研磨),放于容量為50 mL離心管中,注入NaOH溶液25~30 mL,另加玻璃珠約10粒,用橡皮塞塞緊管口,放置在振蕩器上,靜置30 min后,以200~300 r/ min頻率振蕩10~15 min。振蕩完畢,取下離心管上的橡皮塞,用玻璃棒將離心管中的樣品充分?jǐn)噭?,再次用橡皮塞塞緊管口,靜置15~30 min 后,振蕩10~15 min。
2、離心沉淀
從振蕩器上取下離心管,拔掉橡皮塞,用滴管吸取蒸餾水,將附著于橡皮塞上和管口內(nèi)壁的樣品沖入管中,以2000~2500 r/ min速度離心3~5 min后,棄去上清液。然后加適量蒸餾水,并用玻璃棒將沉淀物攪起,按上述方法重復(fù)洗滌三次。
3、 離心漂浮
往離心管中加入少量飽和 NaNO3 溶液,用玻璃棒將沉淀物攪成糊狀后,再徐徐添加飽和 NaNO3 溶液,隨加隨攪,直加到離管口約1 cm為止,用飽和 NaNO3 溶液沖洗玻璃棒,洗液并入離心管中,以2000~2500 r/ min速度離心3~5 min。
用金屬絲圈不斷將離心管表層液膜移于盛有半杯蒸餾水的燒杯中,約30次后,適當(dāng)增加一些飽和NaNO3 溶液于離心管中,再次攪拌、離心及移置液膜,如此反復(fù)操作3~4次,直到液膜涂片觀察不到蛔蟲卵為止。
4、抽濾鏡檢
將燒杯中混合懸液,通過覆以微孔火棉膠濾膜的高爾特曼氏漏斗抽濾。若混合懸液的渾濁度大,可更換濾膜。
抽濾完畢,用彎頭鑷子將濾膜從漏斗的濾臺上小心取下,置于載玻片上,滴加二、三滴甘油溶液,于低倍顯微鏡下對整張濾膜進(jìn)行觀察和蛔蟲卵計數(shù)。當(dāng)觀察有蛔蟲卵時,將含有蛔蟲卵的濾膜進(jìn)行培養(yǎng)。
5 、培養(yǎng)
在培養(yǎng)皿的底部平鋪一層厚約1 cm 的脫脂棉,脫脂棉上鋪一張直徑與培養(yǎng)皿相適的普通濾紙。為防止霉菌和原生動物的繁殖,可加入甲醛溶液或甲醛生理鹽水,以浸透濾紙和脫脂棉為宜。
將含蛔蟲卵的濾膜平鋪在濾紙上,培養(yǎng)皿加蓋后置于恒溫培養(yǎng)箱中,在28 ℃~30 ℃ 條件下培養(yǎng),培養(yǎng)過程中經(jīng)常滴加蒸餾水或甲醛溶液,使濾膜保持潮濕狀態(tài)。
6、 鏡檢
培養(yǎng)10~15 d ,自培養(yǎng)皿中取出濾膜置于載玻片上,滴加甘油溶液,使其透明后,在低倍鏡下查找蛔蟲卵,然后在高倍鏡下根據(jù)形態(tài),鑒定卵的死活,并加以計數(shù)。鏡檢時若感覺視野的亮度和膜的透明度不夠,可在載玻片上滴一滴蒸餾水,用蓋玻片從濾膜上刮下少許含卵濾渣,與水混合均勻,蓋上蓋玻片進(jìn)行鏡檢。
7、 判定
凡含有幼蟲的,都認(rèn)為是活卵,未孵化或單細(xì)胞的都判為死卵。
8、 結(jié)果計算
式中:
K —蛔蟲卵死亡率(%)
N1—鏡檢總卵數(shù)
N2—培養(yǎng)后鏡檢活卵數(shù)