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技術(shù)文章

細(xì)胞染色的方式

閱讀:181          發(fā)布時(shí)間:2025-2-6

細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)后,需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜,若不借助適當(dāng)?shù)氖侄危y以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細(xì)胞的技術(shù),從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段,然而,對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō),想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見(jiàn)的問(wèn)題。

細(xì)胞染色是生物學(xué)研究中常用的技術(shù),它涉及到使用特定的染料或熒光探針來(lái)觀察和分析細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。以下是一些常見(jiàn)的細(xì)胞染色方法和染料:

瑞氏染色(Wright's stain)

染液主要由堿性染料亞甲藍(lán)(美藍(lán))和酸性染料伊red溶于甲醇配置形成。操作簡(jiǎn)單,染色時(shí)間短,對(duì)細(xì)胞質(zhì)成分及中性顆粒染色效果較好。染色效果較差,容易退色,對(duì)細(xì)胞核染色效果較姬姆薩染色法差。保存時(shí)間短,適用于臨時(shí)性檢驗(yàn),如血涂片血細(xì)胞分析。


姬姆薩染色(Giemsa's stain)

染液主要由堿性染料天青色素、酸性染料伊red、甘油和甲醇配制而成。染色效果好,對(duì)細(xì)胞核和寄生蟲(chóng)等效果較好,染色后保存時(shí)間長(zhǎng)退色緩慢。染色時(shí)間較長(zhǎng),成本比較高,對(duì)細(xì)胞質(zhì)成分及中性顆粒染色效果較差。適用于寄生蟲(chóng)檢測(cè)或需要長(zhǎng)期保存的標(biāo)本涂片。


瑞-姬氏染色(Wright- Giemsa's stain)

為復(fù)合染色法,結(jié)合了瑞氏染色和姬姆薩染色的優(yōu)點(diǎn)。染色時(shí)間短,染色效果好,成本比姬姆薩染色法低。不易退色,適用于臨時(shí)性寄生蟲(chóng)或血涂片等檢查。


巴氏染色(Papanicolaou stain)

染液主要由蘇木素、橘黃G6(含橘黃G、磷鎢酸等)、藍(lán)化液、EA50(含淡綠、伊red、乙酸、磷鎢酸等)或EA36(含淡綠、伊red、磷鎢酸等)組成。染色效果好,細(xì)胞著色鮮艷多彩、透明度好、胞質(zhì)顆粒和胞核結(jié)構(gòu)清晰。染色時(shí)間長(zhǎng)(>1h),染色步驟多且復(fù)雜。適用于脫落細(xì)胞學(xué)檢查、上皮細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞檢查。


蘇Wood Essence-伊red染色(Hematoxylin-eosin staining)

染液主要由堿性染料蘇Wood Essence和酸性染料伊red組成。染色效果穩(wěn)定,透明度好,層次清晰,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)對(duì)比鮮明。不能顯示胞質(zhì)分化程度,細(xì)胞核極易過(guò)染,染色時(shí)間較長(zhǎng)(30-40min)。適用于組織病理學(xué)檢查、痰液涂片檢查等。


免疫組化染色(Immunohistochemical staining)

利用抗原抗體之間的特異性結(jié)合,用于研究細(xì)胞產(chǎn)物如分子、蛋白質(zhì)或糖蛋白的表達(dá)、定位、分布和遷移等。


熒光染色

使用熒光染料如Hoechst33258和Hoechst33342等,可以穿過(guò)活細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合,在紫外光下將核染為藍(lán)色。

用于細(xì)胞核染色,可以區(qū)分活死細(xì)胞,但需要注意染色后盡快檢測(cè),以避免熒光淬滅。

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