詳細(xì)介紹
酚試劑常用于Lowry法測定蛋白濃度。它還用于總酚類的定量。在該方法中,蛋白質(zhì)用改進(jìn)的縮二脲試劑(用酒石酸鈉鉀穩(wěn)定的堿性銅溶液
)中的銅(II)進(jìn)行預(yù)處理。酚試劑的加入可產(chǎn)生在550-750 nm間提高吸光值的色原。通常,在尖峰(750 nm)或肩峰(660 nm)處的吸光度用于定量1-100 mg/ml之間的蛋白濃度,而550nm處的吸光度用于定量更高的蛋白濃度。
在沒有銅的情況下,顏色強(qiáng)度主要由蛋白中的酪氨酸和色氨酸含量決定,并在較小程度上由半胱氨酸和組氨酸決定。銅(II)對由酪氨酸、色氨酸或組氨酸而形成的顏色沒有影響,但會由于半胱氨酸而減少顏色形成。
許多對原始檢測流程的修改已得到發(fā)表,包括用于增強(qiáng)顯色、測定不溶性蛋白含量以及過程的自動化。多種物質(zhì)包括許多緩沖劑、螯合劑、去污劑和環(huán)狀有機(jī)化合物都可對Lowry蛋白檢測產(chǎn)生干擾。
酚試劑可在色譜過程中用作噴霧劑。
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