細(xì)胞培養(yǎng)是一種無(wú)菌技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無(wú)微生物和不受其他有害因素的影響，為防止微生物污染和有害因素的影響，細(xì)胞培養(yǎng)室要求環(huán)境清潔、空氣清新、干燥、無(wú)塵。WOL 建設(shè) 細(xì)胞制備儲(chǔ)存實(shí)驗(yàn)室 無(wú)菌室 設(shè)計(jì)裝修

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室由無(wú)菌操作區(qū)、孵育區(qū)、制備區(qū)、儲(chǔ)藏區(qū)、清洗和消毒滅菌區(qū)6部分組成，這些區(qū)域的共同特點(diǎn)是房間要寬敞、明亮，地面要便于清潔、防滑，墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬，儀器設(shè)備布局合理，方便操作，避免交叉干擾，陳設(shè)簡(jiǎn)潔，便于清掃。

無(wú)菌操作區(qū)

無(wú)菌操作區(qū)是只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作的區(qū)域，能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。在一般環(huán)境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，較易造成污染。

因此，接種工作要在空氣經(jīng)過(guò)滅菌的環(huán)境里進(jìn)行，小規(guī)模的無(wú)菌環(huán)境可利用超凈工作臺(tái)創(chuàng)造，大規(guī)模的需建無(wú)菌室。

無(wú)菌操作室應(yīng)劃為三部分：

a) 更衣室―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

b) 緩沖間―位于更衣間與操作間之間，用于準(zhǔn)備工作，還有防止污染的作用，以保證操作間的無(wú)菌環(huán)境，同時(shí)可放置恒溫培養(yǎng)箱以及必需的小型儀器。

c) 無(wú)菌操作間―無(wú)菌操作間則專用于無(wú)菌操作、細(xì)胞培養(yǎng)，其大小要適當(dāng)，且其頂部不宜過(guò)高以保證紫外線的滅菌效果；墻壁光滑以便清洗和消毒，無(wú)菌操作間容積小且為密閉式，一般無(wú)菌操作間的空氣消毒用紫外線燈，有的實(shí)驗(yàn)室使用無(wú)臭氧紫外線消毒器或電子消毒滅菌器。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)要求

1、環(huán)境要求

溫度：儀器還是操作對(duì)溫度沒(méi)有特殊要求，維持舒適的溫度即可，比如18~26度。

濕度：過(guò)高的濕度會(huì)導(dǎo)致微生物的滋生，所以建議正常維持濕度在70%以下。

潔凈度：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)對(duì)潔凈區(qū)并沒(méi)有要求，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)里面只有細(xì)胞操作的時(shí)候要求無(wú)菌的環(huán)境，這時(shí)要求有局部的百級(jí)，通?？梢岳贸瑑襞_(tái)或者生物安全柜來(lái)實(shí)現(xiàn)，不過(guò)有時(shí)候?yàn)榱擞袀€(gè)更好一點(diǎn)的環(huán)境，減小超凈臺(tái)過(guò)濾器更換的時(shí)間，會(huì)維持室內(nèi)的潔凈度，比如萬(wàn)級(jí)的潔凈度。

無(wú)菌無(wú)毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細(xì)胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在100級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行。

在體外培養(yǎng)的細(xì)胞由于缺乏對(duì)微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染，或者自身代謝物質(zhì)積累，可導(dǎo)致細(xì)胞中毒死亡。

照明：滿足實(shí)驗(yàn)用的操作照度，通常在300LUX。

2、圍護(hù)結(jié)構(gòu)要求

雖然實(shí)驗(yàn)的操作對(duì)大環(huán)境沒(méi)有特殊要求，不過(guò)能有不產(chǎn)塵、不積塵的環(huán)境，能保證室內(nèi)的清潔，并且易于清洗、不容易滋生微生物，所以在選擇維護(hù)結(jié)構(gòu)時(shí)，選用彩鋼板、醫(yī)療板等潔凈板材是比較好的選擇，為了保證室內(nèi)的通透性，可以布置密閉窗。

3、消毒

通常做完實(shí)驗(yàn)后，都需要做終末消毒，室內(nèi)需要安裝紫外燈，利用紫外燈對(duì)空氣和表面消毒。

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