以下是解決默克色譜柱常見問題的實(shí)用技巧：
一、柱壓?jiǎn)栴}
1.壓力過高
檢查流速：如果流速設(shè)置過高，會(huì)增加柱壓。適當(dāng)降低流速，但要注意這可能會(huì)延長(zhǎng)分析時(shí)間。例如，將流速從1.5ml/min降低到1.0ml/min，觀察柱壓是否下降到正常范圍。
檢查柱頭和柱尾：柱頭或柱尾堵塞是導(dǎo)致柱壓升高的常見原因?？赡苁怯捎跇悠分械念w粒雜質(zhì)或者緩沖鹽結(jié)晶造成的?？梢詫⑸V柱從儀器上取下，用合適的溶劑（如甲醇 - 水溶液）反向沖洗柱頭和柱尾，去除堵塞物。
檢查色譜柱溫度：溫度變化會(huì)影響流動(dòng)相的黏度，進(jìn)而影響柱壓。確保色譜柱的溫度設(shè)置正確且穩(wěn)定，避免溫度過高或過低。如果柱溫過高，可適當(dāng)降低柱溫；如果過低，可適當(dāng)提高柱溫。
2.壓力過低
檢查連接：查看色譜柱與儀器之間的連接是否緊密，有無泄漏。包括柱入口和出口的接頭，以及管路連接部分。如果有泄漏，重新連接并確保密封良好。
檢查泵系統(tǒng)：泵工作不正常可能導(dǎo)致壓力過低。檢查泵的密封圈是否完好，活塞是否正常工作等。如有故障，及時(shí)維修或更換泵部件。
二、默克色譜柱峰形問題
1.峰拖尾
調(diào)整流動(dòng)相組成：改變流動(dòng)相中有機(jī)溶劑和水的比例，或者添加適量的改性劑，可以改善峰形。例如，對(duì)于某些堿性化合物，在流動(dòng)相中添加少量三乙胺可以減少峰拖尾。
檢查樣品溶解性：如果樣品在流動(dòng)相中溶解性不好，也會(huì)導(dǎo)致峰拖尾。確保樣品完*溶解在流動(dòng)相中，可以通過超聲處理或者改變?nèi)軇w系來提高樣品的溶解性。
檢查色譜柱性能：長(zhǎng)期使用后，色譜柱的硅膠基質(zhì)可能受損或者被污染，導(dǎo)致峰拖尾。可以使用適當(dāng)?shù)那逑闯绦騺砘謴?fù)色譜柱的性能，如用高比例的有機(jī)溶劑沖洗柱子。
2.峰前沿
優(yōu)化梯度洗脫程序：如果是梯度洗脫過程中出現(xiàn)峰前沿，調(diào)整梯度曲線可以使峰形得到改善。例如，采用更緩慢的梯度變化速率或者改變梯度的起點(diǎn)和終點(diǎn)。
檢查進(jìn)樣量：進(jìn)樣量過大可能導(dǎo)致峰前沿，適當(dāng)減少進(jìn)樣量可以避免這種情況。同時(shí)，確保進(jìn)樣時(shí)樣品溶液的濃度適中。
三、默克色譜柱保留時(shí)間和分離度問題
1.保留時(shí)間改變
檢查流動(dòng)相組成穩(wěn)定性：流動(dòng)相組成的變化會(huì)直接影響保留時(shí)間。定期檢查流動(dòng)相中各組分的比例是否正確，并且確保溶劑的純度。例如，如果使用的是混合有機(jī)溶劑，要防止其中一種溶劑揮發(fā)導(dǎo)致組成變化。
檢查柱溫穩(wěn)定性：柱溫的變化會(huì)引起保留時(shí)間的波動(dòng)。保持柱溫恒定，避免環(huán)境溫度對(duì)柱溫的影響。如果柱溫控制不穩(wěn)定，可以檢查柱溫箱的加熱或冷卻系統(tǒng)是否正常工作。
檢查色譜柱老化情況：隨著使用次數(shù)的增加，色譜柱會(huì)逐漸老化，導(dǎo)致保留時(shí)間改變。如果懷疑色譜柱老化，可以用標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)試，對(duì)比新色譜柱和舊色譜柱的保留時(shí)間差異。如果差異較大，可能需要更換色譜柱。
2.分離度降低
優(yōu)化色譜條件：通過調(diào)整流動(dòng)相組成、柱溫、流速等因素來提高分離度。例如，降低流速可以使理論塔板數(shù)增加，從而提高分離度；或者改變流動(dòng)相的極性，使樣品組分之間的分離效果更好。
檢查色譜柱性能：同峰形問題類似，色譜柱性能下降也會(huì)導(dǎo)致分離度降低。及時(shí)清洗和維護(hù)色譜柱，保證其良好的分離性能。
