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引自10x Genomics的亞細(xì)胞空間原位表達(dá)分析技術(shù)(Xenium),通過(guò)已有/定制探針panel與靶點(diǎn),在新鮮冷凍(FF)組織或福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織切片上快速檢測(cè)大量靶點(diǎn)的組織原位轉(zhuǎn)錄本表達(dá)水平,實(shí)現(xiàn)亞細(xì)胞分辨率對(duì)基因進(jìn)行靶向空間原位分析,揭示細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。
一、技術(shù)流程及原理
首先在Xenium載玻片上制備FF或FFPE組織切片(每塊載玻片上的可成像區(qū)域?yàn)?2mm x24mm)。然后對(duì)切片進(jìn)行處理,RNA能更好的與可環(huán)化的DNA探針進(jìn)行雜交。雜交探針連接后產(chǎn)生可酶促擴(kuò)增的環(huán)狀DNA探針。之后將載玻片放入Xenium分析儀中,樣本在其中經(jīng)過(guò)連續(xù)幾輪的熒光探針雜交、成像和去除,產(chǎn)生明亮、易于成像且高信噪比的信號(hào)。接著生成每個(gè)基因特異性的熒光特征條碼,實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因的定位和識(shí)別。最后構(gòu)建出整張組織切片上亞細(xì)胞水平的空間原位圖譜。
二、技術(shù)特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)
1、亞細(xì)胞分辨率
原位顯微成像的檢測(cè)方法,保留RNA分子的原位特征,亞細(xì)胞分辨率水平還原組織中細(xì)胞最真實(shí)的大小和邊界區(qū)分,實(shí)現(xiàn)“真"細(xì)胞-細(xì)胞通訊、受體-配體互作的可視化研究。
2、兼容多樣本類型
兼容新鮮冷凍組織(FF)和福爾馬林固定石蠟包埋組織(FFPE)樣品,滿足臨床及科研樣本的檢測(cè)分析需求。
3、高靈敏性和特異性
平均每個(gè)基因設(shè)計(jì)8對(duì)探針,根據(jù)表達(dá)量高低調(diào)整探針數(shù)量;du特的配對(duì)捕獲探針設(shè)計(jì),增強(qiáng)了檢測(cè)的靈敏性和特異性。
4、panel組合靈活定制
panel基礎(chǔ)上,可靈活定制多至100個(gè)靶標(biāo)基因,更兼容全定制服務(wù),增強(qiáng)了臨床和科學(xué)研究的創(chuàng)新性,同時(shí)可根據(jù)普通轉(zhuǎn)錄組RNA-seq以及單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)scRNA-seq實(shí)驗(yàn)中已獲取的數(shù)據(jù),定制高達(dá)300個(gè)靶點(diǎn)的個(gè)性化研究策略,助力轉(zhuǎn)化研究和空間水平挖掘。
5、全景“無(wú)gap"掃描及玻片再利用
成像區(qū)域(12 x 24 mm)內(nèi)開展超高重靶點(diǎn)的組織全景無(wú)gap掃描,Xenium實(shí)驗(yàn)后仍可繼續(xù)利用同一玻片做其他實(shí)驗(yàn),可高效充分地利用珍貴的臨床樣本。
6、強(qiáng)大的數(shù)據(jù)綜合分析及深度挖掘能力
wan全標(biāo)準(zhǔn)化的集成生物信息學(xué)分析流程,經(jīng)驗(yàn)豐富的多組學(xué)數(shù)據(jù)分析團(tuán)隊(duì),能夠?qū)ι飳W(xué)數(shù)據(jù)及臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合分析及深度挖掘,使得數(shù)據(jù)挖掘更加便捷化、個(gè)性化。
三、技術(shù)服務(wù)內(nèi)容
目前guan方已經(jīng)推出panel包括:人乳腺 280 個(gè)基因、人腦 266 個(gè)基因、人肺 289 個(gè)基因、人皮膚282個(gè)基因、人結(jié)腸322個(gè)基因、人腫瘤免疫380個(gè)基因、人類多種組織癌癥組織377個(gè)基因、小鼠腦 247 個(gè)基因和小鼠組織圖譜379個(gè)基因,以上panel均可增加 1~100 定制化基因。應(yīng)用場(chǎng)景仍在不斷拓展,未來(lái)會(huì)有更多組織類型的商品化 Panel,應(yīng)用于腫瘤、發(fā)育等不同領(lǐng)域的探索。
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