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免疫熒光實(shí)驗(yàn)
一、實(shí)驗(yàn)介紹
免疫熒光(IF),是應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)熒光標(biāo)記抗體對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)。
二、特點(diǎn)及適用范圍
組織學(xué)、胚胎學(xué)、生物學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研。
三、石蠟切片免疫熒光單標(biāo)實(shí)驗(yàn)步驟
石蠟切片
固定——包埋——切片——免疫熒光——拍照——結(jié)果分析
冰凍切片(無(wú)包埋費(fèi))
凍存(-80℃)——切片——免疫熒光——拍照——結(jié)果分析
免疫熒光的片子除了可以用熒光顯微鏡拍照,還可以用激光共聚焦顯微鏡拍照,得到分辨率更高的圖片;激光共聚焦一般用于亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察,如自噬小體、細(xì)胞間納米管道等。
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示
五、送樣運(yùn)輸要求:
樣本放置于5倍樣本體積的4%多聚甲醛固定液中固定24h以上,常溫運(yùn)輸送樣。切勿固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng),切勿冷凍結(jié)冰。
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