Single cardiomyocyte contractility force assay，單個(gè)心肌細(xì)胞收縮力測(cè)定系統(tǒng)

心肌細(xì)胞鈣濃度評(píng)估定量系統(tǒng)

讀數(shù)

單軸收縮力，與力測(cè)量耦合的鈣瞬變分析。

標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)限制

當(dāng) hESC-心肌細(xì)胞在標(biāo)準(zhǔn)條件下培養(yǎng)時(shí)，即在 2D 單層細(xì)胞中，它們以完隨機(jī)的方式組織。因此，無(wú)法量化單個(gè)心肌細(xì)胞跳動(dòng)產(chǎn)生的單軸力。

單一心肌細(xì)胞收縮力測(cè)定的好處

在此測(cè)定中，衍生的心肌細(xì)胞附著在矩形細(xì)胞粘附區(qū)域，這會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞伸長(zhǎng)并促進(jìn)兩個(gè)相鄰微柱之間的懸浮細(xì)胞錨定。收縮力測(cè)定能夠在體外再現(xiàn)導(dǎo)致 CM 跳動(dòng)的興奮-收縮耦合效應(yīng)。

例子

hESC 心肌細(xì)胞中鈣瞬變（鈣敏感收縮蛋白的激活）的量化以及細(xì)胞收縮和力生成的同時(shí)測(cè)量（支柱偏轉(zhuǎn)分析）。

提供力量化分析設(shè)備-微柱陣列細(xì)胞力量化分析系統(tǒng)

微柱培養(yǎng)陣列及其特點(diǎn)：

●每張陣列尺寸為3.2 x 3.2 mm，含10 x 18個(gè)觀測(cè)點(diǎn)，每個(gè)觀測(cè)點(diǎn)有170個(gè)按六邊形排列的微柱

●微柱直徑5 μm，高15 μm，中心間距為12 μm

●微柱彈力范圍1-3 nN（有其他需求可定制）

●標(biāo)準(zhǔn)涂層是纖維連接蛋白或膠原蛋白I

●細(xì)胞外基質(zhì)（EDM）蛋白包可按找需求定制

軟件可用于從光學(xué)顯微鏡拍攝的細(xì)胞圖片中提取細(xì)胞力學(xué)參數(shù)（力/微柱、微柱坐標(biāo)、微柱形變、細(xì)胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布等）（圖3）。分析結(jié)果可保存為Excel表格，便于后續(xù)處理。

圖3

測(cè)量原理：

未變形的微柱在明場(chǎng)圖片中呈較亮的圓形，周圍是較暗的邊，通過(guò)霍夫變換可得到其形心。發(fā)生變形的微柱呈較暗的半月形，通過(guò)圖像處理可得到微柱的形變大?。▓D1）。由于微柱剛度已知，所以進(jìn)而可得到每根微柱產(chǎn)生的力。

系統(tǒng)組成：

1、熒光倒置顯微鏡：

主要用于常規(guī)活細(xì)胞成像，快速高靈敏度活細(xì)胞熒光成像，主要包括顯微平臺(tái)，成像系統(tǒng)，工作站

2、微柱陣列培養(yǎng)設(shè)備：

將硅膠微柱陣列刻在蓋玻片上（圖1 A），并包被蛋白，然后置于培養(yǎng)皿中（圖1 B）。微柱上需要包被蛋白。標(biāo)準(zhǔn)的包被蛋白有纖連蛋白或I型膠原。若需其他包被蛋白，需提前告知。每張微柱陣列可以分析120-150個(gè)細(xì)胞，得到的數(shù)據(jù)足以進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。每種實(shí)驗(yàn)條件可進(jìn)行2-3次實(shí)驗(yàn)，這樣得到的結(jié)果會(huì)更加穩(wěn)定。微柱陣列本身并未進(jìn)行包被，在使用前需要自行包被合適的蛋白（用戶自選，可購(gòu)常用的包被蛋白）。

3、光學(xué)減震臺(tái)

4、預(yù)裝MicroPost細(xì)胞牽引力、內(nèi)源力分析軟件的計(jì)算機(jī)系統(tǒng):

軟件可用于從光學(xué)顯微鏡拍攝的細(xì)胞圖片中提取細(xì)胞力學(xué)參數(shù):（力/微柱、微柱坐標(biāo)、微柱形變、細(xì)胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布等）；

做細(xì)胞如下力學(xué)特性分析，包括：

1)、微柱形變；

2)、細(xì)胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布

3)、細(xì)胞牽引力、內(nèi)源力(cell active force)

4)、主動(dòng)收縮力

我們提供帶有微型PDMS微柱的10毫米蓋玻片，用于細(xì)胞培養(yǎng)和力評(píng)估。

不同的支柱設(shè)計(jì)和布置適合各種應(yīng)用，例如牽引力顯微鏡，收縮力和旋轉(zhuǎn)軸。
通過(guò)測(cè)量PDMS微柱響應(yīng)于細(xì)胞施加的力的撓度來(lái)進(jìn)行力評(píng)估。
>可用
直接接種細(xì)胞
>多種設(shè)計(jì)可供選擇
可用高密度和低密度微柱以及不同縱橫比的基板。
>兼容高分辨率顯微鏡。
易于觀察細(xì)胞及其對(duì)微柱變形的影響

各種微柱陣列并可以定制：

1、圓形PDMS微柱10 mm蓋玻片：

標(biāo)準(zhǔn)尺寸：24 mm圓形蓋玻片（約170μm厚度）
設(shè)計(jì)：直徑為5um； 中心到中心的距離為7um
三種高度可供選擇：2um，6um和12um

2、帶狀柱子的蓋玻片：

在相同的蓋玻片上，有兩個(gè)大小不一的微柱狀帶狀分布（厚度為1毫米）

設(shè)計(jì)帶1：直徑為4um； 中心到中心的距離為8um

設(shè)計(jì)帶2：直徑為2um； 中心到中心的距離為4um

兩種高度可供選擇：2um和6um

3、方形微柱蓋玻片
設(shè)計(jì)：直徑7.5um； 微柱之間的距離為20um
三種高度可供選擇：2um，6um和12um

4、可定制的直徑、高度、間距

相關(guān)產(chǎn)品：

1、 hiPSC心肌細(xì)胞肌節(jié)功能分析系統(tǒng)

2、心肌細(xì)胞高通量鈣瞬態(tài)分析

3、 高通量心肌細(xì)胞、心肌組織、肌肉收縮多功能量化跟蹤分析系統(tǒng)

4、細(xì)胞力產(chǎn)生和力傳遞綜合測(cè)量分析系統(tǒng)

5、各種生物力學(xué)設(shè)備

心肌細(xì)胞鈣濃度評(píng)估定量系統(tǒng)