NipponGenetics Bambanker無血清細胞凍存液
冷凍保存哺乳動物細胞在生物學(xué)研究中非常有價值和普遍。為了防止技術(shù)原因(培養(yǎng)操作)使細胞污染或物理原因(培養(yǎng)箱故障)使長期培養(yǎng)功虧一簣。此外,長期多次的培養(yǎng)和傳代,導(dǎo)致細胞在遺傳學(xué)性狀上的老化和分化都是促使在接收或生成新細胞系后首要考慮的適宜策略就是凍存細胞。低溫凍存對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于*停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0℃到-20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。
如何減少或者避免冰晶形成,如同凍存細菌時用的甘油,DMSO(二甲基亞砜)是一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。凍存液中加入后可以使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細胞內(nèi)的水分逐漸透出,從而減少了冰晶的形成,從而避免細胞的損傷。這就是為什么低溫凍存細胞時為什么要采用慢凍的一個重要原因。
一旦從生長培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到冷凍培養(yǎng)基中,就要執(zhí)行慢凍的過程。盡管冷凍細胞系是通常執(zhí)行的程序,但是當沒有合適的冷凍器具時,或者由于存在血清,額外洗滌或操作不當時,就會出現(xiàn)問題。當然,這個問題是在細胞復(fù)蘇(快融)后才發(fā)現(xiàn)的。發(fā)現(xiàn)復(fù)蘇后的細胞大部分或者全部都是死細胞,甚至還有不容易發(fā)現(xiàn)的整個凍存過程的不當導(dǎo)致的細胞分化。所有這些問題和擔憂,都可以通過BambankerTM細胞冷凍培養(yǎng)基試劑家族來解決。 BambankerTM*的成分允許直接將細胞在-80°C或液氮中冷凍保存,從而避免了對額外設(shè)備的需求,并且也避免了耗時且復(fù)雜的梯度逐漸冷凍方案。
產(chǎn)品特色
• 可在-80°C或-196°C的溫度下長期凍存細胞
• 細胞復(fù)蘇后的活率高
• 即用型冷凍介質(zhì)–無需程序或順序降溫冷凍
• 無血清–無污染風(fēng)險
• 可用于所有已知細胞系
• 保質(zhì)期長
省時省事省力省細胞(Save time while saving your cells)
細胞冷凍培養(yǎng)基BambankerTM允許在-80°C(或液氮)中冷凍保存細胞,從而避免了對額外的設(shè)備的需求,避免了耗時且復(fù)雜的受控冷凍方案。只需(1)離心收獲細胞,(2)抽吸走培養(yǎng)基,(3)細胞重懸浮在BambankerTM中(4)混勻轉(zhuǎn)移到冷凍管中(5)儲存在-80°C下。無需程序降溫或順序降溫! BambankerTM是一種無血清的冷凍保存介質(zhì),可以立即使用,并且可以在冰箱中保存長達兩年。提供20毫升規(guī)格的包裝,使BambankerTM冷凍培養(yǎng)基非常適合實驗室的各個成員獨立使用。如今,這種創(chuàng)新的細胞冷凍培養(yǎng)基BambankerTM已成為日本市場的Leader,其特點是發(fā)表了許多篇文章,涉及*非常敏感的細胞系。
血清增加了長期儲存的差異(Serum adds variation to long-term storage)
所有BambankerTM產(chǎn)品均不含血清。含有血清的冷凍保存培養(yǎng)基具有回收率波動和成分不確定的缺點。凍存于含血清的培養(yǎng)基中的細胞的實驗可重復(fù)性可能會受到批次之間血清差異的影響,因為蛋白質(zhì)和其他生物分子的組成和濃度會隨每批血清而變化。解凍和使用這種含血清培養(yǎng)基的細胞時,可能會導(dǎo)致問題。因為BambankerTM的每種成分都經(jīng)過仔細定義,因此您可以放心,在不同時間存儲的細胞都將有一致的效率。
BambankerTM可防止不期望的分化(BambankerTM prevents undesired differentiation)
不期望的細胞分化也可能是冷凍細胞長期保存的一個問題。 所有Bambanker試劑均旨在盡可能地減少此問題。 對于特別麻煩的細胞,Bambanker不含DMSO的配方經(jīng)過特殊配制,可防止可能與含DMSO的冷凍保存試劑相關(guān)的問題。 因此,請加入越來越多的實驗室的選擇,使用Bambanker保護其細胞系!
多能干細胞的細胞活力和ALP染色
上排:解凍兩天后檢測到大量細胞。 解凍后細胞沒有形態(tài)變化
下排:BambankerTM不會引起細胞分化,因為所有凍結(jié)的干細胞仍會產(chǎn)生高水平的堿性磷酸酶,這是多能干細胞的報告基因
NipponGenetics Bambanker無血清細胞凍存液家族(Family of BambankerTM)
◆操作流程
1)收集生長對數(shù)期*的細胞(5×105-1×107個細胞)
2)用1mL該細胞凍存液懸浮細胞,置于凍存管中,不需預(yù)冷,直接-80℃冷凍保存,也可在-80℃凍存12小時后可轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
3)用恒溫箱或者水浴鍋快速復(fù)蘇細胞
*冷凍細胞必須處于生長對數(shù)期