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小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-05 17:06:31瀏覽次數(shù):760

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
貨號(hào) YS-01X8501 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:肌管素相關(guān)蛋白2抗體 細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白1抗體 NCI-H1341人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 核孔復(fù)合蛋白Nup133抗體 COLO-320人結(jié)腸癌細(xì)胞 FAM123A蛋白抗體 PK-45P人胰腺癌細(xì)胞 大鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!

產(chǎn)品名稱:小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

組織來源:冠狀動(dòng)脈

產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡介:

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維分離自冠狀動(dòng)脈組織;冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,起于主動(dòng)脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干,發(fā)自左主動(dòng)脈竇,經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動(dòng)脈壁的主要細(xì)胞成分,細(xì)胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞


培養(yǎng)步驟:

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

植物銅鋅超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)測試盒(比色法)

乙酰(ACH)測定試劑盒(測血清)(微板法)

總蛋白定量測定試劑盒(帶標(biāo)準(zhǔn):BCA法)(微板法)

總蛋白(TP)測定試劑盒(帶標(biāo)準(zhǔn):雙縮脲法)

8號(hào)染色體開放閱讀框58抗體

凋亡相關(guān)蛋白3抗體

SELL重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原 0.5mgCK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原

BCL6重組人 BCL6 / B-cell CLL lymphoma 6 蛋白 (aa 1-150, His & Trx 標(biāo)簽) Protein

ADK Protein Human 重組人 ADK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FCGR4 Pro僀?僀

CK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原 0.5mgCK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原

ADK Protein Human 重組人 ADK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

SELL重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

FCGR4 Protein Mouse 重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BCL6重組人 BCL6 / B-cell CLL lymphoma 6 蛋白 (aa 1-150, His & Trx 標(biāo)簽) Protein

植物油菜素甾醇(BR)ELISA 試劑盒

Human ai rubella virus IgM aibody (ai-RV IgM) ELISA Kit 人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(ai-RV IgM)試劑盒

Porcinesolublevascuolarcelladhesionmolecules1,sVCAM-1ELISAKit 豬可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒分裝

CLIAKitforAFU(Mousealpha-L-fucosidase)ELISAKit小鼠αL巖藻糖苷酶

血液糖原化學(xué)水解比色法定量試劑盒20

MouseThyroxineaibody,TAbELISAKit小鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA 試劑盒

Rat aithrombin III (AT- III) aibody ELISA Kit 大鼠抗Ⅲ抗體(AT-)試劑盒

HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit 人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)試劑盒分裝

HumanAngiotensinconveingenzyme,ACE試劑盒人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒

植物高質(zhì)化線粒體分離試劑盒10

Humanβ-siteAPP-CleavingEnzyme11BACE1ELISAKit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)試劑盒

收到細(xì)胞如何處理?

小鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作


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