化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肺小動(dòng)脈 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8494 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠肺小動(dòng)脈內(nèi)皮分離自肺小動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈干是短而粗的動(dòng)脈，自右心室的動(dòng)脈圓錐起始，向左后上方斜升，先在升主動(dòng)脈根部的前面，繼而至其左側(cè)，至主動(dòng)脈弓的下方，約在第5胸椎高度，分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短，橫行向左，經(jīng)左主支氣管前方至左肺門(mén)，分兩支進(jìn)入左肺的上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(zhǎng)，橫行向右，經(jīng)主動(dòng)脈升部和上腔靜脈的后方達(dá)右肺門(mén)，分3支進(jìn)入右肺上、中、下葉。左、右肺動(dòng)脈的各分支在肺實(shí)質(zhì)內(nèi)又反復(fù)分支，與支氣管的分支伴行，后達(dá)肺泡壁，形成稠密的毛細(xì)血管網(wǎng)。肺動(dòng)脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血。在肺動(dòng)脈干分叉處稍左側(cè)與主動(dòng)脈弓下緣之間有一結(jié)締組織索，稱(chēng)動(dòng)脈韌帶。管徑在0.3～1mm之間，為小動(dòng)脈（small-artery），小動(dòng)脈包括粗細(xì)不等的幾級(jí)分支，也屬肌性動(dòng)脈。較大的小動(dòng)脈，內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜，中膜有幾層平滑肌，外膜厚度與中膜相近，一般沒(méi)有外彈性膜?？趶皆?span>1mm以下的動(dòng)脈，管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質(zhì)纖維。小動(dòng)脈是決定周?chē)h(huán)阻力大小的主要因素，也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開(kāi)關(guān)"。典型的小動(dòng)脈，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對(duì)比其他動(dòng)脈為厚，當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強(qiáng)力收縮時(shí)，其管腔可以閉塞，而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi)，從而增加了周?chē)貉h(huán)的阻力。如果有許多小動(dòng)脈同時(shí)收縮，可使血壓顯著上升。反之，當(dāng)小動(dòng)脈的平滑肌舒張時(shí)，則可使大量的血液流入毛細(xì)血管，外周阻力明顯下降，血壓降低。終末小動(dòng)脈(terminal arteri-ole)的口徑為20～30μm；后小動(dòng)脈(metar-teriole)，又稱(chēng)毛細(xì)血管前小動(dòng)脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12～15μm。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌，在毛細(xì)血管前小動(dòng)脈分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚，叫做毛細(xì)血管前括約肌(precapillary sphinc-ter)，其收縮或舒張，可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量，是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開(kāi)關(guān)"。支配小動(dòng)脈平滑肌的交感神經(jīng)纖維，可延伸到終末小動(dòng)脈和后小動(dòng)脈的平滑肌細(xì)胞。在毛細(xì)血管前括約肌上交感神經(jīng)纖維特別豐富。肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺小動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺小動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠肺小動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
蔗糖測(cè)定試劑盒（紫外比色法）
γ-谷酰半胱酸合成酶（γ-GCS）測(cè)定試劑盒（速率法）
超微量ATP酶測(cè)試盒（Na+K+、Ca2+Mg2+、T－ATP酶）
總巰基（-SH）測(cè)定試劑盒
MAP激酶相互作用絲/蘇激酶1抗體
FBXL18蛋白抗體
ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
chloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白
GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Recepto僀?僀
chloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白 2mgchloramphenicol/OVA 氯偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白
ACOX1 Protein Human 重組人 ACOX1 / aox 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ICOSLG重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
LDLR Protein Mouse 重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GAPDH重組人 GAPDH 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
植物鈣調(diào)素(CAM)ELISA 試劑盒
Human ai nuclear factor aibody (ANF) ELISA Kit 人抗核因子抗體(ANF)試劑盒
Porcineadiponectin,ADPELISAKit 豬脂聯(lián)素(ADP)試劑盒分裝
CLIAKitforADV-IgM(HumanAdenovirusIgM)ELISAKit人腺病毒IgM
血液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒50次
MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)試劑盒
小鼠肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠鈣/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)試劑盒 ，英文名： CAMK2α ELISA Kit
Rat beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒
RatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒分裝
CLIAKitforDSIP(Humandeltasleep-inducingpeptide)ELISAKit人促睡眠肽
細(xì)胞培養(yǎng)液抗壞血酸比色法定量試劑盒20次
RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit大鼠組織蛋白去乙?；?span>(HD)試劑盒
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