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兔腸道干細胞

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更新時間:2024-11-05 12:06:52瀏覽次數(shù):1173

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X8325 主要用途 僅供科研研究實驗
兔腸道干細胞公司正在出售的產(chǎn)品:人B淋巴細胞瘤細胞+luc;RAMOS-LUC-PURO ISLR2蛋白抗體 人結(jié)腸癌組織源細胞 磷酸化蛋白激酶Aβ抗體 大鼠牙胚細胞 胰島β細胞生長因子抗體 人胃癌組織成纖維細胞 NCK銜接蛋白1/2抗體

詳細介紹

兔腸道干細胞

兔腸道干細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

球形

YS-01X8325

細胞簡介:

兔腸道干分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸道干細胞(ISC)也稱腸道上皮干細胞,主要位于腸黏膜隱窩內(nèi),其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān)。正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個遷移過程大約3-5d,在遷移過程中腸道干細胞分化形成不同的腸黏膜細胞。當受到外界生理或病理信號作用時,ISC可持續(xù)增殖、分化為成熟腸上皮細胞,如腸型細胞、杯狀細胞、內(nèi)分泌細胞和潘氏細胞等,從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的兔腸道干采用-膠原酶聯(lián)合消化后,用腸道干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔腸道經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:懸浮

細胞形態(tài):球形

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔腸道干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔腸道干細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔腸道干細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠巨噬細胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠5核苷酸酶(5-)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠降鈣素原(PCT)ELISA 試劑盒 96T/48T

People mumps virus IgG ELISA Kit 人腮腺病毒IgG 試劑盒

HumanmembraneIgD,mIgDELISAKit 人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgM試劑盒人抗巨細胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(高多糖/)50

Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒規(guī)格:96T/48T

RNA結(jié)合蛋白10抗體

細胞角蛋白24抗體

SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 Protein

肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白 Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)

APP重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標簽) Protein

EIF4EBP1 Protein Human 重組人 4E-BP1 / EIF4EBP1 蛋白

TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白

肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白 Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)

EIF4EBP1 Protein Human 重組人 4E-BP1 / EIF4EBP1 蛋白

SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 Protein

TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白

APP重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標簽) Protein

兔腸道干細胞大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒 ,英文名: IFN-β/IFNB ELISA Kit

Mouse leinizing hormone (LH) ELISA Kit 小鼠促黃體激素(LH)試劑盒

ELISA 小鼠(mouse NO)  進口分裝

CLIAKitforIL-11(HumanIerleukin11)ELISAKIT人白介素11

通用型馬皰疹病毒(EquineHerpesVirusType1)試劑盒20

ELISAKitVEGFR-2大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2


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