技術(shù)文章
轉(zhuǎn)錄組測序研究服務(wù)科研實驗技術(shù)服務(wù)介紹
閱讀:26 發(fā)布時間:2024-9-18lncRNA測序
簡介
長鏈非編碼RNA(longnoncodingRNA,lncRNA)是指長度在200~100000nt之間不具有蛋白編碼功能的RNA分子。它們存在帶polyA尾和不帶polyA尾兩種形式,具有跨物種的低保守性,組織特異性表達(dá)和豐度低等特點。lncRNA的種類遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過編碼RNA,保守估計哺乳動物基因組序列中4%~9%的序列產(chǎn)生lncRNA轉(zhuǎn)錄本,而相應(yīng)的蛋白編碼RNA的比例僅是1%~5%。目前研究提示lncRNA的功能機(jī)制主要包括參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控、蛋白質(zhì)運輸和mRNA降解。lncRNA已經(jīng)成為非編碼RNA研究領(lǐng)域的一個熱點,借助高通量測序,研究人員能夠快速獲得與疾病或者特定生物學(xué)過程相關(guān)的lncRNA并進(jìn)行深入研究。
流程圖
技術(shù)優(yōu)勢
1、信息完善:去rRNA的建庫方法,使得一個文庫可以同時進(jìn)行l(wèi)ncRNA和mRNA的分析,節(jié)省了實驗成本;
2、準(zhǔn)確度高:鏈特異性建庫方法,使得反義lncRNA的鑒定更加準(zhǔn)確;
3、前瞻性好:能發(fā)現(xiàn)大量未知的lncRNA信息,適合各類物種的研究;
4、完整性:獲取完整的lncRNA轉(zhuǎn)錄信息。
smallRNA測序
簡介
smallRNA是生命活動重要的調(diào)控因子,在基因表達(dá)調(diào)控、生物個體發(fā)育、代謝及疾病的發(fā)生等生理過程中起著重要的作用,包括miRNA、piRNA和siRNA,晶能生物公司可以提供各類smallRNA的測序服務(wù)。
1、miRNA:是一種長度為21~25nt的單鏈小分子RNA。它廣泛存在于真核生物中,成熟的miRNA是由具發(fā)夾結(jié)構(gòu)單鏈RNA前體(premiRNA)經(jīng)過Dicer酶加工而成,主要通過與靶標(biāo)基因不wan全互補結(jié)合來調(diào)控靶基因的表達(dá)。miRNA在細(xì)胞發(fā)育、生物標(biāo)志物、腫瘤等多個領(lǐng)域中有廣泛的應(yīng)用。
2、piRNA:是一類長度為26~31nt單鏈的小RNA,大部分集中在29~30nt。piRNA的表達(dá)具有組織特異性,只存在于具有全能性的動物細(xì)胞,如生殖細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和干細(xì)胞等。piRNA通過與Piwi亞家族蛋白結(jié)合形成piRNA復(fù)合物(piRC)來發(fā)揮生物學(xué)功能(沉默轉(zhuǎn)錄基因過程,維持生殖系和干細(xì)胞功能,調(diào)節(jié)翻譯和mRNA的穩(wěn)定性)。此外,piRNA在一些癌癥細(xì)胞中存在異常表達(dá)的現(xiàn)象,提示piRNA可能參與癌癥的發(fā)生,并可作為癌癥診斷和治療中的潛在生物標(biāo)記物。
3、siRNA:內(nèi)源性干擾小RNA(siRNA,SmallinterferingRNA),包括ta-siRNA、ra-siRNA和nat-siRNA。ta-siRNA:天然反義轉(zhuǎn)錄小干擾RNA,由TAS基因編碼,miRNA剪切產(chǎn)生,21nt,作用機(jī)制類似于miRNA;ra-siRNA:由重復(fù)序列、轉(zhuǎn)座子、異染色質(zhì)產(chǎn)生,多為24nt;nat-siRNA:由天然反義轉(zhuǎn)錄本(序列與同區(qū)域互補鏈上基因的mRNA方向相反且發(fā)生部分重疊)產(chǎn)生。siRNA的功能主要與植物脅迫和生物發(fā)育相關(guān)。
流程圖
技術(shù)優(yōu)勢
1、完整性好:一次實驗可以同時檢測多種smallRNA,信息來源于數(shù)據(jù)庫同步;
2、可靠性強(qiáng):高數(shù)據(jù)量保證不同豐度smallRNA都能準(zhǔn)確定量;
3、前瞻性好:能發(fā)現(xiàn)未知的smallRNA信息,適合所有物種的研究。
環(huán)狀RNA測序
簡介
環(huán)狀RNA測序是新興的轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)。過去普遍認(rèn)為細(xì)胞內(nèi)的非編碼RNA多以線型存在,近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn),環(huán)狀RNA在哺乳動物細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)量遠(yuǎn)高于普遍認(rèn)識水平。環(huán)狀RNA可以參與基因的表達(dá)調(diào)控,例如封閉miRNA的作用、調(diào)節(jié)本位基因的表達(dá)等,是長鏈非編碼RNA研究中的一個新的研究熱點。
流程圖