技術(shù)文章
哮喘模型科研實驗技術(shù)服務(wù)介紹
閱讀:32 發(fā)布時間:2024-9-26
應(yīng)用簡介
哮喘是一種嚴重威脅人類健康的常見呼吸道疾病,是一種非特異的氣道慢行邊態(tài)反應(yīng)性炎癥,以嗜酸性粒細胞 (Eosinophils, EOS)聚集、活化及其高毒性陽離子蛋白的釋放、肥大細胞反應(yīng)為主,并伴隨多種炎癥細胞、炎癥介質(zhì)及細胞因子的參與的一種慢性炎癥性疾病。
支氣管哮喘是氣道慢性炎性反應(yīng)性疾病,臨床表現(xiàn)為反復發(fā)作的喘息、氣急、胸悶或咳嗽,這些癥狀經(jīng)常在患者接觸煙霧、香水、油漆、灰塵、寵物、花粉等刺激性氣體或變應(yīng)原之后發(fā)作,夜間和(或)清晨癥狀也容易發(fā)生或加劇。
因哮喘疾病發(fā)生、發(fā)展過程非常復雜,要經(jīng)臨床實踐積累相關(guān)經(jīng)驗,并且人體臨床實驗受到種種限制。因此,在人體深入探討該病的發(fā)病機制、預防及治療有一定困難。所以,制備哮喘動物模型是進行有關(guān)哮喘發(fā)病機制或藥物治療研究成功的關(guān)鍵所在。
支氣管哮喘模型
過敏原卵清蛋白注入大鼠體內(nèi),其可溶性抗原成分刺激機體嗜酸性粒細胞產(chǎn)生特異性免疫素(IgE抗體),附著于肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面,使大鼠處于致敏狀態(tài)。當大鼠再次接觸到此抗原時,每一個抗原分子和致敏肥大細胞、嗜堿性粒細胞的IgE發(fā)生抗原抗體反應(yīng),使細胞脫顆粒,釋放活性物質(zhì),作用于支氣管引起氣道高反應(yīng)性。
實驗方法
①造模組SD大鼠腹腔注射抗原液1 mL(含卵清蛋白100 mg,滅活百日咳桿菌疫苗5×109個和氫氧化鋁干粉100 mg)致敏。
②2周后用超聲霧化器向密閉箱噴霧1%卵清蛋白,使動物吸入20 min激發(fā)。
哮喘模型表現(xiàn)
大鼠模型出現(xiàn)呼吸急促,嚴重者呼吸減慢或節(jié)律不齊,輕度發(fā)紺、四肢癱軟、行動遲滯、反應(yīng)遲鈍。連續(xù)激發(fā)后大鼠體重減輕、毛色失去光澤、反應(yīng)遲鈍。本模型適用于特異性抗原抗體反應(yīng)的研究,有速發(fā)和遲發(fā)雙相反應(yīng)。
技術(shù)總結(jié)
建立大鼠支氣管哮喘模型應(yīng)注意以下幾點:
▲卵清蛋白結(jié)合滅活百日咳桿菌共同致敏較單獨使用卵清蛋白致敏效果突出。
▲多點皮下注射聯(lián)合腹腔注射的造模成功率高于單純腹腔注射。
▲適當提高霧化激發(fā)液的濃度可以加重模型大鼠的肺病理損傷程度。