Halo-Trap Affinity Reagents
HaloTag是來自紅球紅球菌的細(xì)菌鹵代烷脫鹵酶的改良變體 。它被設(shè)計(jì)成與基于反應(yīng)性氯烷的配體形成共價(jià)鍵。當(dāng)與目標(biāo)蛋白質(zhì)靶標(biāo)融合時(shí)，該專門的反應(yīng)位點(diǎn)可進(jìn)行多種生物化學(xué)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，例如亞細(xì)胞定位，酶促測(cè)定等。

Halo-Trap Affinity Reagents

Halo-Trap Affinity Reagents

HaloTag®*是來自紅球紅球菌的細(xì)菌鹵代烷脫鹵酶的改良變體  。它被設(shè)計(jì)成與基于反應(yīng)性氯烷的配體形成共價(jià)鍵。當(dāng)與目標(biāo)蛋白質(zhì)靶標(biāo)融合時(shí)，該專門的反應(yīng)位點(diǎn)可進(jìn)行多種生物化學(xué)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，例如亞細(xì)胞定位，酶促測(cè)定等。

生化分析的一個(gè)重要方面是直接從表達(dá)該構(gòu)建體的細(xì)胞中獲得HaloTag蛋白。Halo-Trap是一種高質(zhì)量的HaloTag結(jié)合蛋白，與瓊脂糖珠偶聯(lián)，用于HaloTag融合蛋白及其相互作用伙伴的超高親和力純化。使用Halo-Trap，即使共價(jià)結(jié)合到HaloTag配體（例如熒光染料）上，也可以免疫沉淀HaloTag-fusion蛋白。HaloTag融合蛋白甚至無需蛋白酶即可洗脫！這種多功能的親和試劑與免疫沉淀，Co-IP，質(zhì)譜和酶活性測(cè)量兼容。

Halo-Trap可以進(jìn)行細(xì)胞成像和生物化學(xué)純化。
輸入（I），未結(jié)合（FT）和結(jié)合（B）的級(jí)分通過SDS-PAGE分離，然后進(jìn)行考馬斯亮藍(lán)染色，蛋白質(zhì)印跡和熒光掃描。由于Halo-Trap在其催化中心外的表位上與HaloTag結(jié)合，因此以類似的效率捕獲了未結(jié)合的HaloTag融合蛋白（左）和與諸如HaloTag TMR之類的配體共價(jià)結(jié)合的HaloTag融合物。這種從細(xì)胞中進(jìn)行的超高效，一步純化，使成像和純化成為可能?，F(xiàn)在，也可以純化用HaloTag配體處理的細(xì)胞進(jìn)行成像，以進(jìn)行生化研究-使HaloTag系統(tǒng)像GFP-Trap系統(tǒng)一樣具有廣泛的表達(dá)能力。