產(chǎn)品簡介
這些微小的融合蛋白由衍生自重鏈駱駝科動物抗體的抗原結合域(VHH)遺傳融合至熒光蛋白(例如,來自Evrogen的TagGFP或TagRFP)組成,可以在培養(yǎng)的細胞內(nèi)內(nèi)源性表達。與常規(guī)抗體不同,這些創(chuàng)新的熒光納米探針適用于實時分析,并且可以可視化活細胞中的細胞結構和過程。
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Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector
Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector
Dnmt1染色體體的小尺寸可產(chǎn)生高信噪比,以產(chǎn)生令人震驚的高分辨率圖像或染色質(zhì)甲基化動力學的定時電影。值得注意的是,它對甲基化模式?jīng)]有影響,并且在大多數(shù)細胞類型中均表現(xiàn)出極低的毒性。只需用Dnmt1 Chromobody質(zhì)粒轉染您選擇的細胞系即可。該質(zhì)粒包含與TagRFP或TagGFP(Evrogen)融合的Dnmt1特異性羊駝抗體的序列。轉化后,您的細胞將表達Dnmt1染色體抗體。由于熒光體分子特異地定位于DNA甲基轉移酶,因此細胞核將發(fā)出擴散和點狀的熒光。
用Dnmt1-Chromobody質(zhì)粒轉染HeLa細胞,并在生長和分裂過程中對其進行觀察。每30分鐘對細胞成像24小時??笵nmt1-TagRFP染色體抗體將DNA甲基轉移酶與細胞核結合。在G期細胞中,信號通過細胞核和細胞質(zhì)均勻分布。隨著時間的流逝,在S期,顆粒以復制灶的形式出現(xiàn)在細胞核中,后顆粒消失,細胞分裂。
在整個細胞周期中,Dnmt1-Chromobody轉染HeLa細胞的靜態(tài)圖像。這次,使用抗Dnmt1-TagGFP融合蛋白,隨著細胞通過S期,復制灶的形成可以看成亮綠色的點。Dnmt1-Chromobody不影響正常細胞功能。
納米抗體是*的小抗體片段,表現(xiàn)出與靶蛋白的超高效結合。在動物細胞中表達的納米抗體可以被收集并用于體外研究。當納米抗體表達為與報告分子(例如GFP)的融合體時,發(fā)生了一些出乎意料的事情。新形成的染色體抗體直接與目標細胞內(nèi)的靶標結合。而且,使用正確的載體和啟動子,結合具有高特異性和低背景。這為GFP-融合與感興趣的蛋白質(zhì)的免疫定位研究提供了*的選擇。為什么?因為已經(jīng)顯示了GFP和RFP融合可以阻斷或改變?nèi)诤系鞍椎幕钚?。相反?/p>