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Spot-Trap Affinity Reagents
Spot-Trap是高質(zhì)量的Spot-Tag結(jié)合蛋白與設(shè)計(jì)用于免疫沉淀或親和純化方案的樹脂基質(zhì)偶聯(lián)。它只會(huì)與Spot-Tag融合蛋白上的新型12個(gè)氨基酸序列相互作用。

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Spot-Trap是高質(zhì)量的Spot-Tag結(jié)合蛋白與設(shè)計(jì)用于免疫沉淀或親和純化方案的樹脂基質(zhì)偶聯(lián)。它只會(huì)與Spot-Tag融合蛋白上的新型12個(gè)氨基酸序列相互作用。與其他短肽“標(biāo)簽”系統(tǒng)相比，Spot-Tag具有許多特點(diǎn)。與所有Nanobody-Traps一樣，Spot-Trap結(jié)合蛋白是一種小的（14.7 kDa）單價(jià)高親和力單克隆羊駝抗體（“ nanobody”），可識(shí)別N端的Spot-Tag序列基序（PDRVRAVSHWSS）表達(dá)的融合蛋白的C末端或C末端。Spot-Trap與瓊脂糖或磁性瓊脂糖微珠表面共價(jià)偶聯(lián)，可快速有效地進(jìn)行免疫沉淀和親和純化。它針對(duì)斑點(diǎn)標(biāo)記蛋白及其相互作用伙伴的生化分析進(jìn)行了優(yōu)化。它已經(jīng)過多種應(yīng)用的測(cè)試，并且可以在各種系統(tǒng)（例如細(xì)菌，酵母，哺乳動(dòng)物細(xì)胞系和昆蟲細(xì)胞）中高效運(yùn)行。對(duì)于包括質(zhì)譜法和酶活性測(cè)量在內(nèi)的生化分析，可以使用Spot-Trap通過免疫沉淀快速有效地分離Spot-Tag-fusion蛋白及其相互作用因子。

右邊是蛋白質(zhì)印跡，證明了從全細(xì)胞提取物中得到的p53的有效性。在這種情況下，使用p53-Trap對(duì)HEK 293T細(xì)胞的蛋白質(zhì)提取物進(jìn)行p53的免疫沉淀（IP）。通過SDS-PAGE和隨后的Western印跡分離對(duì)輸入（I），未結(jié)合的流通量（FT）和結(jié)合的（B）組分進(jìn)行Western分析。