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固相萃取裝置 SPE固相萃取技術(shù)
固相萃取的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)
在什么項(xiàng)目的前處理適合使用固相萃取技術(shù),即用固相萃取會(huì)比普通的溶劑萃取更理想,個(gè)人認(rèn)為有以下幾種情況:
(一) 水中有機(jī)物的前處理。
此類常規(guī)處理基本上是用與水不相溶的有機(jī)溶劑振蕩萃取,用固相萃取的優(yōu)勢(shì)在于
(1)可以定量地重復(fù)前處理過(guò)程。
溶劑振蕩的操作一般只能要求到控制時(shí)間的程度,卻無(wú)法控制振蕩頻率,強(qiáng)度,動(dòng)作,我們知道,每個(gè)人的振蕩動(dòng)作是不同的,就是同一個(gè)人,也很難保證始終劃一的動(dòng)作。所以說(shuō),溶液萃取的動(dòng)作是不定量,不能重復(fù)的。
而在應(yīng)用固相萃取時(shí),比較容易保持過(guò)柱和洗脫速度的均一和穩(wěn)定,因此,固相萃取的萃取過(guò)程是可以重復(fù),可定量的。
(2)現(xiàn)場(chǎng)處理。
水中有機(jī)物的分析有一個(gè)長(zhǎng)期困擾我們的瓶頸。即有機(jī)物在池塘水庫(kù)等環(huán)境中能保持相對(duì)穩(wěn)定,但是一旦進(jìn)入采樣瓶這個(gè)小環(huán)境中,就會(huì)迅速發(fā)生變化,所以很多水的有機(jī)物分析方法要求即采即分析,不能超過(guò)4 個(gè)小時(shí),可一般的情況是,從取水回到實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間就遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止4 小時(shí)了,樣品發(fā)生了變化,分析結(jié)果的可靠性可想而知。
如果引入固相萃取技術(shù),由于其設(shè)備簡(jiǎn)單,體積小,易于攜帶,可以做到在現(xiàn)場(chǎng)一邊采樣,一邊進(jìn)行前處理。采樣者帶回實(shí)驗(yàn)室的是固相萃取柱,而不是水樣。這樣就能保證我們處理的是真正成份穩(wěn)定的水樣。
從實(shí)際應(yīng)用來(lái)說(shuō),在水的檢測(cè)中用固相萃取技術(shù)取代傳統(tǒng)液液萃取還有相當(dāng)?shù)墓ぷ餍枰鳎壳吧胁荒苋〈?,但是其發(fā)展的前景很值得看好。
(3)有機(jī)試劑消耗量的減少。
在處理水樣時(shí),如果用固相萃取,則只需要在洗脫時(shí)用到有機(jī)溶劑,用量比傳統(tǒng)液液萃取要少數(shù)十倍以上。對(duì)于實(shí)驗(yàn)者的人身保護(hù)和環(huán)境保護(hù)有著積的意義。
二)批量生物材料的藥物成分萃取
這是固相萃取在實(shí)際應(yīng)用中比較成功的范例,主要是指在醫(yī)院中檢測(cè)血樣和尿樣時(shí)的前處理工作,由于對(duì)藥物成份的吸附是固相萃取的優(yōu)勢(shì),加上樣品單一,組成固定,在確定方法后很適合大規(guī)模批量的凈化操作。
(三)免疫親和固相萃取。
萃取的理想狀態(tài)就是特異性富集或特異性排斥,可是不論是溶液萃取還是固相萃取,基本上是相似相溶的,Z多做到“某一類"層次上的萃取,而無(wú)法達(dá)到“某一種"層次的萃取。
在固相萃取柱的基礎(chǔ)上加上免疫親和技術(shù),可以利用其生物特異性選擇吸附,能夠達(dá)到近于理論的萃取。
實(shí)際困難在于雖然其概念很好,但是由于技術(shù)難度相對(duì)較高,可供應(yīng)用的更少。
三、固相萃取的應(yīng)用局限性
?。?)樣品局限性
固相萃取不適于處理固體樣品。對(duì)于固體,將其先制備為液體形態(tài)才能進(jìn)行固相萃取操作,這一點(diǎn)就遠(yuǎn)不如液體萃取了。
即使是液體樣品,固相萃取也有其額外的苛刻要求,即液體潔凈度高,不能有懸浮物或其它固體顆粒,否則會(huì)在柱前形成堵塞,無(wú)法繼續(xù)過(guò)柱及洗脫操作。所以固體樣品要制備成液體,液體樣品還要過(guò)濾。相比來(lái)說(shuō),溶劑萃取就不存在這個(gè)麻煩,稍臟點(diǎn)也影響不大。
?。?)結(jié)構(gòu)局限性
固相萃取柱的結(jié)構(gòu)很簡(jiǎn)單,除了塑料管,只有篩板和填料了。就這簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu),帶來(lái)了便利,也帶來(lái)了與生俱來(lái)的矛盾,一些我們?cè)谟萌軇┹腿r(shí)永遠(yuǎn)不會(huì)遇到的矛盾。
矛盾1 液面的問題。
當(dāng)我們進(jìn)行活化、凈化,洗脫等典型的固相萃取操作時(shí),會(huì)使用不同溶劑,這時(shí)的操作要求在液面下降到篩板時(shí)換加不同溶劑,加得太晚,會(huì)使填料中干涸產(chǎn)生氣泡,影響結(jié)果的穩(wěn)定性(甚至?xí)驗(yàn)槿芤旱膹埩栴}而使液面無(wú)法下降)。相反,如果加得太晚,會(huì)使加入溶液和在篩板上的原有溶液混合,產(chǎn)生一個(gè)其實(shí)是我們不希望存在的、無(wú)法預(yù)料性的新洗脫液,使結(jié)果的可靠性大打折扣。
加液加到篩板,說(shuō)得容易做起來(lái)難,如果單獨(dú)做一個(gè)樣品可以緊盯液面操作。但是在批量操作時(shí)只會(huì)顧此失彼,固相萃取技術(shù)實(shí)用的一個(gè)重要意義就在于,其可以方便可靠地批量處理樣品,如果這個(gè)意義的話,其實(shí)用性也就大大降低。
液面問題是制約固相萃取應(yīng)用成功的主要瓶頸,雖隱蔽卻無(wú)法回避。