產(chǎn)品分類品牌分類

分子生物試劑: tiangen Beyotime selleck EZBioscience國內(nèi)授權(quán)代理 celetrix addexbio adamas nano Tosoh Megazyme Advanced ImmunoChemical代理 ADS Biotec Ademtech inalco abpcorp abm abitec abgent abclonal abbott abberior AbboMax A-M systems Biocheck cusabio MCE MatTek ICl ProFoldin BioGrammatics aobious USP Proteintech QuaCell phadebas Parkell Omega NSJ Bioreagents Nof America ChromoTek Bioind bachem Apexbio Teknova ozbiosciences代理 pnabio Sage Science rPeptide Medical isotopes StemRD scripps SantaCruz Lifecore Genway Click chemistry tools Advanced Biotech AB vector QuickZyme Innovative Research of America Incell Formedium fapas zyagen nanohelix lucerna Innovative Cell Technologies Encapsula NanoSciences dianova alstem abbexa Worthington Viagen trilink panbio NIBSC matreya Enquirebio AGL Cell Guidance Systems ScienCell lucigen listlabs EpiCypher MicroGem RAN Biotech emfret Echelon Cape Cod aves labs aqix appexbio Pel-Freez PBL MRC-Holland mclab Merck CDN Isotopes Abways biotium leebio InGex Chromsystems Hellbio goldbio bioflux agrisera代理 agdia Advanced ImmunoChemical ABT beads beckman Creative PEGWorks Equitech genovis Horizon Kerafast mirus Maxim Biomedical invivogen Brainbits sero Engibody Biosearch Assaypro Advanced Cell Diagnostic Norgen NeuroMab E＆K Scientific國內(nèi)授權(quán)代理 Spherotech Eastcoast Aviva NEB Affinity Biologicals zeptometrix Coriell Lsbio zymo toyobo abcam VMRD Nist國內(nèi)授權(quán)代理 Greatcell solar Enzo Biolegend Cygnus Bethyl JPT 分子生物試劑代購 seracare國內(nèi)授權(quán)代理 Lifesensors kapa國內(nèi)授權(quán)代理 Sigma代理 SSI Diagnostica國內(nèi)授權(quán)代理 G-biosciences國內(nèi)授權(quán)代理 Fisher北京代理 Moltox國內(nèi)授權(quán)代理 Vector Badrilla Bangs labs Expression system Chromogenix nano Composix BioChain國內(nèi)授權(quán)代理 Agrisera Bioclone Cellscript Cyagen Chrono-log Epigentek Biorad Applied Biosystems Fitzgerald vwr Tocris Phyto GeneTex E＆K Scientific Eylabs Diazyme Cell Biolabs SP scienceware Signalchem Lexogen BioXcell AB Biolabs ImmunoVision GlycoTech Fisher Agar Scientific Abbiotec Anatrance Thermo賽默飛 Takara Smobio HyPhen Biomed Axis-Shield Altogen Agilent安捷倫 Advansta Mybiosource Fortebio Biomerieux EMS Bioivt Usbio Advanced BioMatrix Toxin

化學(xué)品: Omicron IsoSciences Chem service polysciences caisson PurePEG Berry＆Associates Ricca 國內(nèi)授權(quán)代理 OlChemIm apollo mekoo TRC化學(xué)品授權(quán)代理 Berry Associates Cayman medkoo

國內(nèi)授權(quán)代理

查看更多分類

培養(yǎng)基常見問題

時間：2024/1/10閱讀：662

一、如何選用培養(yǎng)基? 選擇培養(yǎng)基沒有一定標(biāo)準(zhǔn)，有幾點建議可供參考：

1. 建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細胞第一個選的培養(yǎng)基?？梢圆殚單墨I，或在購買細胞株時咨詢。

2. 根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選1640；進行細胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實驗，可選擇IMDM。

3. 用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞，觀察其生長狀態(tài)，可以用生長曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷，根據(jù)實驗結(jié)果選擇最佳培養(yǎng)基，這是最客觀的方法，但比較繁瑣。

4.ATCC（American Type Culture Collection）收集了絕大多數(shù)細胞的詳細資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cells and hybridomas鏈接，輸入細胞名稱就可以搜索ATCC的細胞數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)庫中有每一種細胞的詳細描述，包括細胞的來源，培養(yǎng)和凍存條件，以及相關(guān)文獻等資料。

二、液體培養(yǎng)基可以放-20℃保存嗎？

不可以！因為在-20℃下，培養(yǎng)基中的鹽容易析出，培養(yǎng)基融化后，有的鹽可能無法重新溶解，從而導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓降低，培養(yǎng)細胞時，細胞容易破裂而死亡。

三、新配制的液體培養(yǎng)基能保存多久？

我們建議將新配制的培養(yǎng)基放置于4℃，避光保存盡量在一周內(nèi)使用完畢。培養(yǎng)基越新鮮越好。

四、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎？

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

五、培養(yǎng)基中是否須添加抗生素？

除了特殊篩選系統(tǒng)外，一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下，培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。

為防止細菌、真菌污染，可以加入青霉素-鏈霉素雙抗溶液，其培養(yǎng)基中的終濃度為青霉素100U/ml，鏈霉素為100ug/ml。

六、為何培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中，顏色會偏暗紅色，且pH值越來越偏堿性？

培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO₂ 會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑（通常為phenol red）的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之CO₂，以調(diào)整pH 值。

七、培養(yǎng)液pH是怎樣影響細胞生長的？

由于大多數(shù)細胞適宜PH值為7.2-7.4，偏離此范圍對細胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細胞對PH值要求也不全部相同，原代細胞培養(yǎng)一般對PH值變動耐受差，無限細胞系耐受力強。但總體來說，細胞耐酸性比耐堿性強一些，偏酸環(huán)境中更有利于細胞的生長。因此，配制培養(yǎng)用液時可把液體的PH值稍微調(diào)的偏酸一些。液體在經(jīng)過0.1um或0.2um濾膜過濾時，PH值會向上浮動0.2左右。

八、為什么液體培養(yǎng)基1640顏色發(fā)黃，是pH值不對嗎？

不是。因為配方原因，1640為堿酚紅型，其中酚紅的濃度只有DMEM的四分之一，所以是因為酚紅濃度低，而非PH值低。

九、為什么有客戶要求培養(yǎng)基中不含酚紅？

研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，細胞培養(yǎng)，尤其是哺乳類細胞時，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細胞檢測時，不使用加酚紅的培養(yǎng)基。

十、放置在冰箱中的培養(yǎng)基顏色會發(fā)生變化，為什么？

培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)CO₂會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中酸堿指示劑（通常為phenol red）的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿后再用于細胞培養(yǎng)將造成細胞生長停滯或死亡。培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾的CO₂，以調(diào)整pH值。

十一、無血清培養(yǎng)與有血清培養(yǎng)使用的抗生素量一樣嗎？

當(dāng)在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。因為血清中的蛋白會結(jié)合和滅活一些抗生素。而在無血清培養(yǎng)條件下，抗生素不被滅活。

十二、培養(yǎng)基各個成分的作用有哪些？

1.NaHCO₃的作用是什么？

與二氧化碳一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定。

2.丙酮酸鈉的作用是什么？

丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM，-20℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為1mM.

3.加入HEPES有何好處？

培養(yǎng)基中經(jīng)常用的Buffer system是碳酸氫鹽，它可提供營養(yǎng)，但卻在生理PH值條件下會降低緩沖能力。而HEPES是一種很強的Buffer，加入HEPES能使細胞培養(yǎng)基在PH7.2-7.6條件下緩沖能力增強。HEPES的貯存液濃度一般為1M，常溫保存。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM，即5ml 1M的HEPES加入到200ml全部培養(yǎng)基中。

4.酚紅的作用是什么？

酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。

5.谷氨酰胺的作用是什么？

幾乎所有的細胞對谷氨酰胺都有較高的要求。谷氨酰胺脫掉氨基后，可作為培養(yǎng)細胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。

谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲存兩周以上時，應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。

試驗操作中常配制高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支），分裝使用，-20℃保存。使用時，每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml全部培養(yǎng)基中，使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。

欧美……一区二区三区,欧美日韩亚洲另类视频,亚洲国产欧美日韩中字,日本一区二区三区dvd视频在线

培養(yǎng)基常見問題

會員登錄

收藏該商鋪

提示